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目的 探讨蛋白尿致肾小管间质纤维化发生发展早期的相关分子机制，即肾小管蛋白负荷状态下肾组织血小板反应蛋白(TSP-1)的表达趋势与转化生长因子(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)、尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)及纤溶酶原激活物抑制物(PAI-1)表达的相关性，及其在早期纤维化形成过程中的作用。探讨干预治疗对上述各细胞因子的影响。 方法 采用蛋白负荷肾病幼年大鼠为实验性肾病动物模型，用免疫组织化学单染和双染法检测TSP-1、TGF-β1及uPA在蛋白水平的表达；用组织原位杂交法检测CTGF及PAI-1在mRNA水平的表达；分析上述各指标在病变进展过程中的变化特点及相关性。测同期尿蛋白及血生化各项指标观察其变化特点。予苯那普利及低分子肝素钙治疗3周，观察上述各指标的变化情况，判断治疗的干预效果。 结果 在给予大鼠经腹腔注射牛血清白蛋白(BSA)3天后开始测24小时尿蛋白，即可见明显升高(模型组36.6±15.19mg／24h对照组7.16±1.42mg／24h P=0.000)。于第9天达高峰131.10±18.3mg／24h(对照组7.31±1.71mg／24h)，随后出现短暂下降，第30天再次出现明显上升104.29±21.77mg／24h(对照组6.51±0.66mg／24h P=0.000)。常规病理切片上于各级肾小管中可见明显蛋白管型形成，但血生化指标未出现肾功能衰竭的改变。免疫组化半定量分析方法测得的TSP-1蛋白表达的阳性细胞或阳性小管染色积分值于第3天即明显增高为2.42±0.26(对照组2.12±0.24 P=0.04)。随病程进展，表达高峰在第9天3.39±0.41(对照组2.06±0.691，随后表达虽有减弱，仍持续高水平存在至30天为2.71±0.13(对照组1.97±0.39P=0.001)。免疫组化半定量分析方法测得的TGF-β1蛋白阳性细胞或阳性小管染色积分值第6天明显增高为2.63±0.14(对照组1.70±0.56 P=0.01)，山西医科大学2003届硕卜研究生学位论文表达高峰为第9天2.63士o.14(对照组1.70士0.56)，随后表达虽有减弱，仍持续高水平存在至30天2.75士0.22(对照组1.65士0.39)。原位杂交半定量分析方法测得CTGF mRNA的阳性细胞或阳性小管染色积分值第6天明显增高2.75士0.13(对照组1.98士o.24p=0.02)表达高峰为第9天3.98士0.35(对照组2.01士0.16)，随后表达虽有减弱，仍持续高水平存在至30天为3.36士0.12(对照组1.94士0.15P=0.00)。TSP一l、TGF一日1蛋白表达及CTGFmRNA表达高峰都在第9天，随病程进展，表达虽有下降仍持续高水平存在至30天，上述细胞因子的表达趋势与蛋白尿的发展趋势相同步。经相关分析提示TSP一1、TGF一pl蛋白表达变化与CTGF mRNA表达变化趋势一致。三者表达变化呈明显的正相关关系，具有显著性意义(rl=0.842r2一0.971)。免疫组化半定量分析方法测得的uPA蛋白阳性细胞或阳性小管染色积分值从第9天开始出现明显下降为1.18士0.12(对照组1.53士0.30)，随病程进展，为持续低水平表达。原位杂交半定量分析方法测得的PAI一lmRNA表达阳性细胞或阳性小管染色积分值从第3天开始出现明显上升为2.33士0.20(对照组1 .75士0.44)。表达高峰在第9天3.76士0.18(对照组1.55士。，64)，随后表达虽有减弱，仍持续高水平存在至30天为2.76士0.12 (对照组1.47士0.20)。TSP一1蛋白表达变化与PAI一lmRNA表达变化正相关。在病初期TSP一1蛋白表达与uPA蛋白表达负相关，而随病程进展这种相关性不明显。UPA蛋白表达与PAI一lmRNA表达相关性不明显。TSP一1蛋白表达变化与PAI一lmRNA表达变化趋势一致。应用苯那普利和低分子肝素钙联合治疗后，从第2周开始治疗组与未治疗组比较，24小时尿蛋白明显下降64.29士4.44 mg(未治疗组89.00士9.O6mg)，这种变化持续至第3周末46.71士7.93 mg(未治疗组1 04.29士21 .77mg)。未治疗组随病程进展尿蛋白呈逐渐卜升趋势，而治疗组尿蛋白逐渐卜降。血生化指标__二组间无明显著异。TSP一1蛋白表达治疗组与未治疗组比较第3周明显一下降2.12士0.14(未治疗组2.71士0.13)，随病程进展TSP一l蛋自在未治疗组持续高表达，而在治疗山西医科大学20()3届硕仁研究生学位论文组表达则逐渐减弱。TGF一pl蛋白表达治疗组与未治疗组比较第2周开始明显下降2.14士0.17(未治疗组2.78士0.07)，这种变化持续至第3周1.7了士0.43(未治疗组2.了5士0.22)。随病程进展，TGF一pl蛋白在未治疗组持续高表达，而在治疗组表达则逐渐减弱。CTGF mRNA表达治疗组与未治疗组比较第3周出现明显下降2.07士0.巧(未治疗组3.36士0.12)。随病程进展未治疗组CTGF mRNA仍持续高表达，而治疗组CTGF mRNA表达逐渐减弱。uPA蛋白表达治疗组与未治疗组比较第2周明显升高1.92士0.13 (未治疗组1.47士0.13)持续至第3周2.08士0.17(未治疗组1，41士0.18)。随病程进展未治疗组uPA蛋白表达逐渐减弱，治疗组u队则持续高表达，且有升高趋势。PAI一lmRNA表达治疗组与未治疗组比较第1周明显下降2.39士0.65(未治疗组2.96士0.19)，这种变化持续至第3周1.71士0.02(未治疗组2.76士0.12)。随病程进展，队I一lmRNA在未治疗组仍持续高表达，而在治疗组表达逐渐减弱。 结论幼年肾病大鼠肾小管蛋?