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芳香基硫酸酯酶（ARS）是一类水解芳香基硫酸酯的酶，在9种已知的芳香基硫酸酯酶中，ARSA和ARSB广泛分布于人体各个器官和组织中。芳香基硫酸酯酶活性的变化与组织细胞内生理和病理条件的改变具有密切的相关性。在多种恶性疾病和肿瘤病症中，芳香基硫酸酯酶活力都呈现显著的升高，它作为标志物在临床诊断中已经得到广泛的应用。而芳香基硫酸酯酶作为肿瘤治疗的靶点还尚待研究。本课题旨在建立一种简便快速、高效灵敏的芳香基硫酸酯酶抑制剂筛选模型和药效检测模型，即根据改进的芳香基硫酸酯酶活性的测试方法，建立并优化筛选体系；采用该筛选体系对经过预选的多种天然产物进行筛选；结合酶学和细胞能量代谢水平的检测，以获得对肿瘤细胞中芳香基硫酸酯酶ARS有显著影响的天然产物小分子抑制剂，并研究芳香基硫酸酯酶抑制剂对于肿瘤细胞整体的影响。本课题通过测试肺癌细胞系A549、PC-9、A427的芳香基硫酸酯酶活性，由于A549细胞ARS酶活力明显高于其他两株细胞系，而选择通过A549细胞裂解总蛋白的方式获得芳香基硫酸酯酶，并根据现有的酶活力测试方法，改进并建立了用于筛选芳香基硫酸酯酶抑制剂的方法。该方法利用4-MUS为底物，在365nm波长下激发，通过读取450nm波长下发射光数值后计算比较可筛选芳香基硫酸酯酶抑制剂。此后本课题通过以Frex-Mit、Frex-Cyt质粒转染PC-9细胞系的方式，获得了能在500nm下激发，在530nm下发射荧光而反映细胞内NADH代谢强度的细胞系。通过Gefitinib药物作用，验证了这一生物探针在PC-9细胞中的灵敏性，并且检测到PC-9胞浆内NADH代谢的显著变化。通过此技术手段，建立了能够快速检测候选药物对于肿瘤细胞影响效果的模型。通过对121种天然产物小分子的筛选，初步获得了2种较有研究价值的天然产物小分子3-G6和4-H11。在1μM和10μM浓度下利用这两种天然产物小分子对A427、A549和PC-9细胞进行了细胞woundhealing实验，这两种天然产物小分子在1μM下对细胞划痕愈合速率产生的影响不显著，但在10μM下显著可观察；后以转染后的PC-9细胞模型检测0.5μM和1μM浓度下这两种天然产物小分子对PC-9细胞能量代谢的影响，分析可见微弱的差异变化。