复方莪术散对子宫内膜异位症患者细胞周期蛋白A及P21表达的影响

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子宫内膜异位症是目前严重影响中青年妇女健康和生活质量的常见病、多发病。内异症发病机制复杂,病变广泛,其病因有多种学说,如子宫内膜种植学说、淋巴及静脉播散学说、体腔上皮化生学说、诱导学说、遗传学说及免疫调节学说等等,但这些学说都没能很好地解释子宫内膜异位症类似恶性肿瘤的临床行为,如种植、侵袭及转移等。近年来,一些研究者从肿瘤的发病角度对内异症的病因及病变进展进行研究。已证实恶性肿瘤的发病等与细胞周期的异常改变有关,有国内外学者就子宫内膜异位症与细胞周期的关系进行研究,并由此推测内异症的发病可能与某些细胞周期蛋白的不正常表达及增殖等有关。本课题选择细胞周期蛋白A及P21作为检测指标,观察其在子宫内膜异位症患者异位及在位内膜的表达,以及对照组中的表达的差异,探讨其在内异症发生、发展过程中的作用及意义。中药颗粒制剂复方莪术散是导师曹保利教授根据内异症患者“肾虚血瘀”的基本病症,结合多年临床经验研制出的治疗内异症的代表方剂,本研究同时检测了应用复方莪术散对内异症患者细胞周期蛋白A及P21在异位及在位内膜表达的影响,从而为复方莪术散治疗内异症的临床研究提供更全面的实验数据。目的:1、观察细胞周期蛋白A (CyclinA)及P21在子宫内膜异位症患者异位内膜组织、在位内膜组织中的表达,进而探讨细胞周期蛋白A及P21在内异症发生、发展中的作用及临床意义。2、观察应用复方莪术散对卵巢子宫内膜异位症患者异位、在位内膜组织中CyclinA及P21表达的影响,探讨复方莪术散的作用机制,从而为复方莪术散的临床应用提供理论依据。方法:1、选取病例对照的研究方法对CyclinA及P21蛋白在子宫内膜异位症患者异位内膜组织及正常子宫在位内膜组织中的表达进行研究。64例标本全部来源于天津市南开医院2011年1月~2013年1月住院行腹腔镜或开腹治疗的患者,其中卵巢子宫内膜异位症34例(手术组)同时取其异位内膜及在位内膜,正常对照组30例子宫内膜来自同时期因其他妇科疾病行手术的患者,主要为输卵管系膜囊肿、输卵管粘连及输卵管吻合等。应用免疫组化方法检测CyclinA及P21蛋白在异位内膜和在位内膜中的表达情况。2、选择因巧克力囊肿行手术治疗并经病理证实的患者69例,其中35例(用药组)于手术前3个月开始规律服用复方莪术散直至手术前停药,34例(手术组)术前未经过任何中医及西医方面的治疗直接手术;选择同期因其他妇科疾病行手术的患者,主要为输卵管系膜囊肿(卵巢冠囊肿)及输卵管粘连等并经病理证实的患者30例作为对照组。采用免疫组化方法检测用药组和手术组异位、在位内膜及对照组子宫内膜组织中的CyclinA及P21蛋白表达水平。结果:1、免疫组化染色光镜观察CyclinA及P21蛋白阳性表达产物主要定位于子宫内膜腺细胞及间质细胞的细胞核中,阳性表达为棕黄色颗粒。CyclinA在异位内膜组织中阳性表达率均明显高于在位内膜组织(P>0.05)及对照组(P<0.05);P21在对照组的阳性表达率高于异位内膜组织(P<0.05)和在位内膜组织(P>0.05),异位内膜组织P21阳性表达率低于同组在位内膜,但无统计学差异。2、免疫组化染色光镜观察CyclinA在用药组异位和在位内膜表达量明显低于手术组异位和在位内膜表达量,差异有统计学意义(P<0.05),高于对照组子宫内膜表达量,但差异无统计学意义(P>0.05);P21在对照组子宫内膜表达量明显高于手术组异位和在位内膜(P<0.05),高于用药组异位和在位内膜,但无统计学意义(P>0.05);用药组异位和在位内膜表达量明显高于手术组异位和在位内膜表达量(P<0.05)。结论:1、在对照组子宫内膜组织中,CyclinA低表达而P21高表达,而在卵巢子宫内膜异位症患者异位内膜组织中CyclinA表达明显增高,高于在位内膜组及对照组;而P21表达明显降低,低于在位内膜组及对照组,表明CyclinA和P21在子宫内膜异位症的发病中可能存在一定作用,为进一步研究子宫内膜异位症提供了新的理论方向,同时为靶向治疗内异症提供了新的依据。2、复方莪术散能明显下调子宫内膜异位症患者异位内膜组织及在位内膜中CyclinA的表达水平,同时能明显上调P21蛋白的表达水平,尤其在中、重型(Ⅲ期~Ⅳ期)子宫内膜异位症患者用药后效果尤其显著,这一发现为围手术期应用复方莪术散提供了更有利的理论支持,即术前应用复方莪术散可能使异位病灶软化、萎缩,从而达到缩小手术范围和简化手术操作的目的;而手术后配合应用复方莪术散,可能对清除残余微小病灶及抑制复发等发挥作用,且颗粒制剂中成药副作用小,依从性好,可能更适用于对激素抑制治疗有抵抗的患者。
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