银杏(Ginkgo biloba L.)是中国传统的药源植物,其主要的药用部位为叶片.银杏叶提取物(EGb)及其制剂的主要成分是银杏黄酮类和萜内酯类化合物,对脑损伤、脑缺血、哮喘、器官移植排斥、老年痴呆症等多种疾病有显著疗效,是心血管疾病的主要用药之一,具有广泛的市场.目前的银杏制剂均来源于银杏叶片,其生产受原料产地、季节、资源等限制,应用银杏细胞工程生产药用成分是重要的药源替代途径之一.该研究以银杏的种子胚和种子萌发30天的幼苗茎切段(1cm)外植体诱导出的愈伤组织为材料,建立细胞悬浮培养体系,研究了悬浮细胞的生长及其分化与细胞中黄酮类和萜内酯类化合物积累的关系,并且研究了植物生长调节剂和培养条件对细胞生长、分化及黄酮类和萜内酯化合物积累的影响,为银杏细胞2工程生产银杏黄酮和银杏萜内酯的应用奠定了基础.银杏类型Ⅰ和类型Ⅱ悬浮细胞均在21天达到最大生长量,黄酮类化合物的积累随细胞的生长而增加,悬浮细胞的黄酮类化合物产量在培养的24天达到最大,此时收获细胞,在类型Ⅱ悬浮细胞中的黄酮类化合物含量(7.6mg/gDW)比类型Ⅰ悬浮细胞中的含量(3.6mg/gDW)高一倍.用高效液相色谱在银杏类型Ⅰ和类型Ⅱ悬浮细胞中都检测到了银杏内酯A、B和白果内酯.悬浮细胞中的叶绿体分化程度以及细胞聚集成的细胞团的大小对其中的萜内脂的种类和含量都有影响.该研究还尝试了用发根农杆菌转化银杏细胞及器官分化对萜内酯生成的影响,但目前未能获得转化的发根,只在感染部位生成了愈伤组织.在诱导银杏胚愈伤组织的器官分化的研究中,只在附加2.3μmol/L2,4-D,0.4μmol/L BA的MS培养基上有不定根的发生,生根频率为4.5％.