酸性微环境下胃癌SGC7901细胞自噬水平的变化及其对细胞增殖影响的研究

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目的:探究酸性环境下胃腺癌细胞株SGC7901自噬水平的改变以及这种改变对细胞增殖活性的影响。方法:选择人胃腺癌细胞株SGC7901作为研究细胞;采用透射电镜、激光共聚焦显微镜检测酸应激对胃癌细胞株SGC7901自噬体形成情况的影响;用Western-Blot检测短时间和长时间暴露于酸性条件下培养的SGC7901细胞自噬相关蛋白LC3-II、p62的表达情况,分别探究不同时间长度酸性环境作用下SGC7901细胞自噬水平的变化,并检测巴伐洛霉素A1处理后SGC7901细胞LC3-II、p62表达,探究酸性条件下SGC7901细胞自噬流的变化;通过CCK-8法检测抑制酸性环境下的自噬对细胞增殖活性的影响。结果:1.透射电镜下观察到,与中性环境下培养的SGC7901细胞相比,酸性环境中培养的胃癌SGC7901细胞内自噬体、自噬溶酶体形成增多;激光共聚焦显微镜下观察到酸性条件下培养的SGC7901细胞细胞内LC3荧光颗粒较中性环境下培养的SGC7901细胞细胞内LC3荧光颗粒数量增多,中性环境下培养的SGC7901细胞细胞内LC3荧光弥散分布。2.与中性环境下培养的SGC7901细胞相比,酸性条件下培养的的胃癌SGC7901细胞LC3-II生成增多,p62表达减少;长时间培养于pH 6.5环境下的胃癌SGC7901细胞LC3-II持续高表达,p62持续低表达。3.酸性环境下自噬流增强。4.抑制酸性环境诱导的自噬可引起细胞增殖抑制。结论:胃癌SGC7901细胞在酸性环境中自噬水平上调,且这种自噬在长时间培养时持续稳定存在,不会随时间的延长发生增多或衰减。胃癌SGC7901细胞在酸性环境下较在正常环境下增殖缓慢;在酸性环境和正常环境下抑制自噬均可以引起胃癌SGC7901细胞增殖抑制,酸性环境下的自噬对胃癌SGC7901具有保护性作用。
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