RhoA/ROCK通路在牵张力损伤大隐静脉中的实验研究

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目的明确不同牵拉力强度对大隐静脉损伤程度的关系,定义无损伤牵拉力,并初步探讨其对Rho A/ROK信号通路的表达差异和在桥血管损伤的作用机制的调节。方法60例无张力条件下获取的小腿大隐静脉,随机分为5组,每组12例:A组为对照组,无牵拉(<10g,0.098牛顿),剩余标本在同一方向的不同强度拉力持续牵拉3min。B组为牵拉力20g(0.196牛顿),C组为牵拉力40g(0.392牛顿),D组为牵拉力60g(0.588牛顿),E组为牵拉力80g(0.784牛顿)。获取的样本应用CUSTODTOL HTK液(心肌保护麻痹溶液)保护组织完整性,予不同牵拉力处置,放入福尔马林液中固定,石蜡包埋,HE染色行病理检查,高倍镜(400X)下观察切片病理改变。应用免疫组化方法,检测Rho A、ROCK蛋白表达量水平。通过免疫组化的方法,应用细胞核抗原染色,测定平滑肌细胞增殖水平。应用Western-blot方法测定桥血管Rho A、ROCK的表达水平。结果Rho A/ROCK蛋白在牵张力损伤大隐静脉中均有表达,且与大隐静脉损伤程度成正相关,所受牵张力强度越大,其表达水平越高;随着牵拉时间的增加,Rho A/ROCK的表达水平升高,Rho A/ROCK蛋白在牵拉3min后表达水平高于无张力组(P<0.05),牵拉5min达到峰值(P<0.01),牵拉10min表达水平与5min无异,和无张力组相比显著升高。结论Rho A/ROCK通路激活是牵张力损伤大隐静脉的重要机制之一,根据Rho A/ROCK表达情况,可以初步评估大隐静脉损伤程度,抑制其表达可降低静脉桥血管的损伤。
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