论文部分内容阅读
大花君子兰(Clivia miniata Regel)亦称君子兰,为石蒜科君子兰属植物,多年生草本花卉,其株型端庄、叶姿挺拔、叶片对称、四季常青、终生碧绿或墨绿;花姿优美、花色艳丽、盛花期颇为壮观,被誉为“中国室内花卉的皇后”。组织培养不但可以保留亲本的优良性状同时可以高效稳定的繁殖,是产生大量株型一致的有效途径。目前仍然存在离体繁殖再生频率低,复制性差等技术难题。本研究通过对大花君子兰‘和尚’、‘油匠’、‘细叶’和‘水晶’君子兰4个品种的组织培养研究,发现相同培养条件下不同品系对愈伤诱导率和分化率影响较大,其中,‘油匠’品系再生率最高。获得以下研究结果:(1).外植体的采集时间:以当年生幼嫩花序为外植体最好;以幼蕾期的花托为外植体最好,愈伤组织诱导率达68.8%~88.9%。(2).外植体灭菌方法:无菌超净台中75%酒精浸泡30 s后,用0.1%g/ml氯化汞溶液处理8 min,无菌蒸馏水冲洗4遍。(3).适宜培养条件为:温度25±2℃,光照24 h/d,光照强度2000 lx,接种前不宜进行长时间暗培养处理。p H值为5.8-6.2。当PH为5.8时,组培苗的增高生长较快,利于增殖培养;当p H为6.2时,组培苗生长较为健壮,利于壮苗培养。(4).愈伤组织诱导:‘和尚’以MS+BA 4.0 mg/L+NAA 2.0 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L为最佳培养基,诱导率达到84.6%;‘油匠’、‘细叶’和‘水晶’均以MS+BA 2.0 mg/L+NAA 2.0 m g/L+2,4-D 3.0 mg/L为最佳培养基,诱导率分别为90.7%、75.6%、78.0%;公共最佳培养基为MS+BA 2.0 mg/L+NAA 2.0 mg/L+2,4-D 3.0 mg/L;p H为5.8,加入蔗糖30 g/L,琼脂条4.5 g/L,此时诱导率最高,长势最佳,培养40 d,外植体的平均启动率达81.7%。(5).组织分化诱导:‘和尚’和‘油匠’以MS+NAA 0.5 mg/L+KT 1.0 mg/L为最佳培养基,诱导率分别达到60.0%、91.4%;‘细叶’和‘水晶’以MS+NAA 1.0 mg/L+KT 3.0 mg/L为最佳培养基,诱导率分别达到73.5%、68.7%;公共最佳培养基为MS+NAA 0.5 mg/L+KT 1.0 mg/L,平均诱导率达66.45%;平均出芽数为16.7个。增强光照强度,设定昼夜温差以及适当增大培养基营养元素的浓度,利于培育健壮的增殖苗。(6).生根培养:‘和尚’、‘细叶’以1/2 MS培养基加入蔗糖25 g/L,琼脂条4.5 g/L的生根效果最好,生根率分别达94.8%、100%;‘油匠’以1/2 MS培养基加入蔗糖25 g/L,NAA 0.5 mg/L+KT 0.25 mg/L琼脂条4.5 g/L的生根效果最好,生根率达97%‘水晶’以1/2 MS培养基加入蔗糖35 g/L,NAA 0.25 mg/L+KT 0.25 mg/L,琼脂条4.5 g/L的生根效果最好,生根率达98.9%;公共最佳培养基为以1/2 MS培养基加入蔗糖25 g/L,NAA 0.5 mg/L+KT 0.25 mg/L琼脂条4.5 g/L的生根效果最好,平均生根率达95.9%。