二苯乙烯苷对大鼠颈动脉球囊损伤平滑肌细胞增殖及PTEN表达的影响

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目的:探讨二苯乙烯苷(TSG)对大鼠颈动脉球囊损伤后血管平滑肌增殖及内膜增生的影响以及与PTEN表达的关系。方法:于南华大学动物实验中心取雄性SD大鼠30只,重量约350-400g,随机分为3组,每组10只:假手术组(颈外动脉结扎)、手术组(行球囊扩张损伤)、二苯乙烯苷组(TSG干预)。手术组和TSG组行颈总动脉球囊扩张建立颈总动脉球囊损伤模型,二苯乙烯苷组术前一周即对大鼠行二苯乙烯苷溶液灌胃干预,术后第14d取颈总动脉球扩标本,一部分标本用甲醛固定后石蜡包埋,行组织切片HE染色,在光学显微镜下观察血管平滑肌及内膜增生情况,并用Image-ProPlus6.0软件测量血管内膜及中膜面积比,评估血管增生情况;一部分标本行免疫组织化学染色和Western Blot检查,检测组织中PTEN的表达并于三组间进行比对。结果:1、HE染色:于光镜下观测血管平滑肌细胞增殖及内膜增生情况,并测量内膜中膜面积比,结果显示:假手术组血管管腔解剖结构清楚,颈总动脉平滑肌层及内膜层无明显增殖表现,平滑肌层无增粗,未见新生内膜形成;手术组及TSG组血管管腔狭窄,平滑肌层及内膜层均有增殖表现,管腔缩小,管壁增厚,说明血管经球囊扩张损伤后平滑肌层及内膜有增生,大鼠颈动脉球囊扩张模型建立成功;TSG组与手术组相比,血管平滑肌层及内膜层增殖表现相对较轻;HE染色结果提示:血管经球囊扩张损伤后平滑肌层及内膜层有增殖表现,二苯乙烯苷能够抑制血管平滑肌及内膜层增生。2、PCR、Western Blot:检测各组血管标本中PTEN的表达水平,结果显示:相比于假手术组,手术组PTEN表达增高(p<0.05),说明血管球囊损伤后PTEN的表达增高;而TSG组相对于手术组,PTEN的表达进一步增高(p<0.05);提示:二苯乙烯苷可以上调血管球囊扩张后PTEN的表达,结合平滑肌层及内膜层增殖表现,其抑制血管损伤后的增殖机制可能通过上调PTEN的表达实现。结论:1、二苯乙烯苷可以抑制血管球囊损伤后平滑肌增殖及内膜增生;2、其机制可能与上调PTEN的表达有关。
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