大肠杆菌CMP-唾液酸合成酶最小活性域的研究

来源 :中国科学院微生物研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dingchao0907
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
大肠杆菌CMP-唾液酸合成酶(EC2.7.7.43)是参与生物体内糖链唾液酸化的一个关键酶.大肠杆菌CMP-唾液酸合成酶催化CTP与唾液酶结合生成CMP-唾液酸.比较已知的CMP-唾液酸合成酶的氨基酸序列同源性,发现大肠杆菌的CMP-唾液酸合成酶保守区域主要位于N-端.推测其C-端对酶的催化活性无影响.通过PCR方法,对大肠杆菌CMP-唾液酸合成酶C-端编码区进行了一系列的截短,将得到的C-端截短的缺失突变酶在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中表达,发现从C-端截去189个氨基酸的缺失突变酶仍有活性,说明大肠杆菌CMP-唾液酸合成酶的活性区域主要集中在N-端的229个大氨基酸.有催化活性的C-端缺失突变合成酶的比活、最适pH及热稳定性发生变化,说明被截去的C-端的氨基酸残基虽不直接参与构与酶的催化活性中心,但可能影响酶的催化活性域的折叠及稳定性.通过二级结构分析及三维结构模拟,分析结果表明第210-227位氨基酸残基在形成催化域的正确构象中起重要作用;第230-283位氨基酸残基所形成的二级结构对催化域的构象起稳定作用,其中230-245位氨基酸残基可能起关键作用,而第246-283位氨基酸残基可能只起部分稳定作用.C-端是否还具有其它功能,还有待于进一步研究.
其他文献
风力发电作为一种新型可再生能源发电技术,其分布广、无污染、取之不尽用之不竭,已经成为目前最具商业开发前景的分布式发电技术之一。但随着大规模风电场接入电力系统,因其
相比于两电平逆变器,多电平逆变器具有电网电流谐波含量低、系统效率高及滤波器体积小等优点。在所有的多电平拓扑中,当输出相同电平数时,级联H桥逆变器所用元器件最少,布局
电力营销智能化管理成为当前电力企业发展的重点,已经得到了社会的广泛关注.本文将围绕电力营销智能化管理应用方式进行阐述,详细的分析在不同方面的应用优势以及特点,旨在为
现代化工业企业进行电气工程自动化控制技术升级,是利用智能化先进技术为工程控制提供重要保障.电气自动化技术运用智能化中控运行的模式,实现电气工程自动化控制.随着我国经
本文由文献综述和研究论文两部分组成。 一、文献综述。 1、介绍了爬行动物性别决定机制的两种主要类型:基因型性别决定和环境性别决定两种机制; 2、从SOX基因的一般
第一部分、AVP调控基因的新途径 AVP是精氨酸加压素在脑内的天然酶解产物,具有促进学习记忆的功能,它能在大鼠脑内引起一系列生理生化反尖,RT-PCR结合Southern杂交结果表明,A
随着电力系统自动化水平的不断提升,电网运行对实时数据质量的要求越来越高,因此针对不良数据的检测与辨识就显得尤为必要。传统的不良数据检测方法基本都是估计后的算法,需要反
该实验综合动物营养学、免疫学和生物学等学科的方法和技术,首次较为系统地研究了仔蟹对维生素C(Vitamin C,V)与E(Vitamin E,V)的营养需求;V、V以及V与免疫多糖对河蟹非特异
相比于传统能源,风力发电在节能减排方面具有明显优势,是除水力发电外,开发最快、技术最成熟、经济效益最高的新能源发电技术。伴随着风电设备制造水平及相关技术的快速发展,更大规模的风电将并入电力系统,同时也对系统的安全性与稳定性带来了不小的挑战。究其原因,风力发电的强随机性、强波动性及不易调控的特点,成为制约风电扩大发展规模的重要影响因素。目前对风电功率变化特性的分析大多应用于风电资源评估或规划,对服务
电力设备飞速发展的过程中,电能作为一种清洁、无污染对能源,必须要得到充分利用,在变电运维一体化作业模式逐渐落实的过程中,变电运维安全管理工作也要得到全面的发展.因此,