丑海参和白底辐肛参生物活性成分研究

来源 :第二军医大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:yanwensen
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丑海参(Holothuria impatiens)和白底辐肛参(Actinopyga mauritiana)为海参纲海参科中的2种常见的棘皮动物,在我国南海海域有着广泛的分布。本课题以稻瘟霉模型为活性追踪分离的筛选手段,应用大孔树脂、正相硅胶、反相硅胶、葡聚糖凝胶以及高效液相色谱法等多种色谱分离技术,对两种海参所含的抗肿瘤和抗真菌活性成分进行了系统的化学成份和生物活性研究。共分离得到20个单体化合物(丑海参11个,白底辐肛参9个),综合应用多种现代波谱技术(1H NMR, 13C NMR, DEPT, DQCOSY, HMBC, HMQC, TOCSY, NOESY, ESI-MS和HR-MS等)和化学方法测定了所有单体化合物的化学结构,所有化合物均为首次从上述海参中分离测定,其中4个为新化合物。从丑海参中分离测定了11个化合物,其中9个为海参皂苷,1个海参皂苷元,1个为海参生理物质腺苷,经化学水解获得。化合物1(HI-1):3-O-[3-O-甲基-β-D-吡喃葡萄糖-(1→3)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)-β-D-吡喃奎诺糖-(1→2)-4-O-硫酸钠-β-D-吡喃木糖]-22, 25-环氧-海参烷-9(11)-烯-3β,12a-二醇,为新化合物,命名为17-Dehydroxyholothurin A;化合物2(HI-2):3-O-[3-O-甲基-β-D-吡喃葡萄糖-(1→3)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)-β-D-吡喃奎诺糖-(1→2)-4-O-硫酸钠-β-D-吡喃木糖]-海参烷-9(11)-烯-3β,12a-二醇,经文献检索确定为Pervicoside C;化合物3(HI-3):3-O-[3-O-甲基-β-D-吡喃葡萄糖-(1→3)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)-β-D-吡喃奎诺糖-(1→2)-4-O-硫酸钠-β-D-吡喃木糖]-22, 25-环氧-海参烷-9(11)-烯-3β,12a, 17a-三醇,经文献检索确定为Holothurin A;化合物4(HI-4):3-O-[3-O-甲基-β-D-吡喃葡萄糖-(1→3)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)-β-D-吡喃奎诺糖-(1→2)-4-O-硫酸钠-β-D-吡喃木糖]-海参烷-9(11)-烯-3β,12a,17a,22-四醇,经文献检索确定为Holothurin A1;化合物5(HI-5):3-O-[β-D-吡喃奎诺糖-(1→2)-4-O-硫酸钠-β-D-吡喃木糖]-22, 25-环氧-海参烷-9(11)-烯-3β,12a, 17a-三醇,经检索确定为Holothurin B;化合物6(HI-6):3-O-[β-D-吡喃奎诺糖-(1→2)-4-O-硫酸钠-β-D-吡喃木糖]-22, 25-环氧-海参烷-9(11)-烯-3β,12a-二醇,经文献检索确定为Holothurin B3。化合物7(HI-7):3-O-{3-O-甲基-β-D-吡喃葡萄糖-(1→3)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)-β-D-吡喃奎诺糖-(1→2)-[3-O-甲基-β-D-吡喃葡萄糖-(1→3)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-β-D-吡喃木糖}-海参烷-9(11), 24(25)-二烯-3β,12a-二醇,为新化合物,命名为Impatienside A;化合物8 (HI-8):3-O-{3-O-甲基-β-D-吡喃葡萄糖-(1→3)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)-β-D-吡喃奎诺糖-(1→2)-[3-O-甲基-β-D-吡喃葡萄糖-(1→3)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-β-D-吡喃木糖}-海参烷-9(11)-烯-3β,12a-二醇,经文献检索确定为Bivittoside D;化合物9(HI-9):3-O-{3-O-甲基-β-D-吡喃葡萄糖-(1→3)-β-D-吡喃木糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→2)-[3-O-甲基-β-D-吡喃葡萄糖-(1→3)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-β-D-吡喃木糖}-23S-乙酰氧基-海参烷-7(8)-烯-3β-醇,经文献检索确定为Stichloroside B1;化合物10(HI-10):海参烷-22, 25-环氧-7(8), 9(11)-二烯-3β, 17a-二醇,为Holothurin A的苷元;化合物11(HI-11):腺苷。从白底辐肛参中分离测定了9个化合物,其中6个为海参皂苷,3个为生理活性物质。化合物12(AM-1):3-O-[3-O-甲基-β-D-吡喃葡萄糖-(1→3)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)-β-D-吡喃奎诺糖-(1→2)-4-O-硫酸钠-β-D-吡喃木糖]-海参烷-9(11)-烯-3β, 12a, 17a-三醇,经文献检索确定为Echinoside A;化合物13(AM-2):3-O-[3-O-甲基-β-D-吡喃葡萄糖-(1→3)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)-β-D-吡喃奎诺糖-(1→2)-4-O-硫酸钠-β-D-吡喃木糖]-22, 25-环氧-海参烷-9(11)-烯-3β,12a, 17a-三醇,经文献检索确定为Holothurin A;化合物14(AM-3):3-O-[4-O-硫酸钠-β-D-吡喃奎诺糖-(1→2)-4-O-硫酸钠-β-D-吡喃木糖]-22, 25-环氧-海参烷-9(11)-烯-3β,12a, 17a-三醇,经文献检索发现为一新化合物,命名为Mauritianoside A;化合物15(AM-4):3-O-[β-D-吡喃奎诺糖-(1→2)-4-O-硫酸钠-β-D-吡喃木糖]-22, 25-环氧-海参烷-9(11)-烯-3β,12a, 17a-三醇,经检索确定为Holothurin B;化合物16(AM-5):3-O-[β-D-吡喃奎诺糖-(1→2)-4-O-磺酸基-β-D-吡喃木糖]-海参烷-9(11)-烯-3β, 12a, 17a-三醇,经文献检索为一新化合物,命名为Mauritianoside B;化合物17(AM-6):3-O-[β-D-吡喃奎诺糖-(1→2)-4-O-硫酸钠-β-D-吡喃木糖]-海参烷-9(11)-烯-3β, 12a, 17a-三醇,经文献检索确定为Echinoside B;化合物18(AM-7):3-乙酰氧基-3,4-二氢萘-2-磺酸;化合物19(AM-8):尿嘧啶脱氧核苷;化合物20(AM-9):胸腺嘧啶脱氧核苷。对上述部分化合物进行了初步的抗肿瘤和抗真菌活性研究,体外细胞毒活性筛选表明:HI-7,HI-8和HI-9三种海参皂苷对HT-29,HCT-116,DU145,MCF-7,A549,HepG2,KB等7种肿瘤细胞株具有显著的抑制活性,IC50值在0.37-2.72之间,与临床使用的抗肿瘤药VP-16的抑制率相当;HI-6对P388小鼠白血病细胞无细胞毒活性,但对A549人肺癌细胞显示弱的细胞毒活性。5种海参皂苷的抗真菌活性筛选表明:除HF-10外,HI-1,HI-3, HI-5和HI-9对多种真菌生长均有不同程度的抑制作用,MIC80值均小于32μg/ml,值得扩大菌株做进一步的抗真菌作用研究。本课题对丑海参和白底辐肛参中的化学成分和生物活性进行的深入系统研究,为研发海洋来源的抗肿瘤和抗真菌药物提供了新的先导化合物,为开发海参的药用价值提供了科学依据,为海洋天然产物化学积累了新的研究资料,对开发我国丰富的海洋生物资源具有重要的意义。
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