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S100基因家族是一个编码钙离子结合蛋白的家族，共有21名家族成员。该家族中许多成员的表达在多种肿瘤形成过程中出现异常；同时该家族中有16名成员染色体定位均位于1q21区带，该区稳定性差，易发生染色体的缺失、易位、重叠等改变，与肿瘤的发生关系密切；且表皮分化复合体(epidermal differentiation complex，EDC)也定位在染色体1q21区带，与人类上皮分化密切相关，其成员即包括了这16名S100家族成员。由于食管上皮是一种复层扁平鳞状上皮，因此推测：S100基因家族与食管鳞癌的发生发展可能存在某种联系。本研究选取了13个定位于染色体1q21区带的S100基因和3个定位于其它染色体区段的S100基因作为研究对象，探讨它们在食管鳞癌及其相应配对组织中的差异表达情况，并进一步选取其中的S100A14基因进行更深入的研究。最终希望能找到可能的食管鳞癌易感基因，对阐明食管鳞癌的形成机制有所裨益，并为寻找食管鳞癌的早期肿瘤分子标志物做一定的基础工作。 方法： 本课题首先采用半定量逆转录-聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR)的方法，在62例食管鳞癌及其配对的正常食管粘膜组织中，从RNA水平检测了16个S100基因的差异表达情况，并用统计学方法对结果进行了详细的分析。接着我们选取S100A14基因作为进一步研究的对象，运用Northern印迹杂交、Western印迹杂交的方法，从RNA郑州大学2003届硕士学位论文5100基因家族在人食管鳞癌中的差异表达及5100A14基因的进一步分析和蛋白两个水平对5100A14在人食管鳞癌及其配对组织中的表达和在成人某些正常器官组织中的表达进行了研究。同时，又以不同时期C57小鼠(包括小鼠胚胎、新生小鼠、成年雄性小鼠)及其多种脏器作为研究材料，用RT一PCR的方法检测了其中51 OOAI4基因表达情况。结果:1.5100基因家族的RT一PCR检测结果 11个5100基因在人食管鳞癌中的表达显著下调，分别为:SI00AI，SI00AZ，S了OOA4，S了OOAS，S了OOA夕，S了OOAIO，51口OAll，SIOOAIZ，51口0A14，S了口0B，S了oop基因;仅51口0A7基因表达显著上调(p<0.05);另外4个基因:Slo0A3，s1口0A‘，sI口0A月，s了。口z基因差异表达不显著(p>0.05)。对结果的统计学分析还表明，5100B基因与食管鳞癌的组织分化程度显著相关(p<0.05)。多个在食管鳞癌中表达失调的5100基因之间具有相关性(p<0.05)，如:sI口砍10与S100All(r=0.7559)，SI00AZ与SI00AS(厂0.6829)，SI00AZ与SI00AI4 (r=0 .68 18)等。2.SI00AI4基因的Northern杂交结果 SI00A14基因Northern杂交的结果进一步验证了RT一PCR结果，在所检测的5对食管鳞癌及其配对组织中，s100AI4基因在癌组织中的表达均下调。在所检测的正常子宫内膜、胃、肝脏组织中，没有检测到s1OOAI4基因的表达。3.S100A14蛋白的W七stern杂交结果 8对食管鳞癌及其配对组织中的Western杂交结果表明，在8例病人中，与配对的正常食管组织相比，510OA14蛋白于5例食管鳞癌组织中表达下调，2例差异表达不显著，1例表达上调。在正常成人的不同脏器中，仅在食管、结肠、小肠、胃中检测到S100A14蛋白的表达，且由食管到胃表达呈逐渐降低趋势，其它组织包括肝、脾、心、肺、肾、肾上腺、膀肤、输尿管、前列腺及甲状腺组织中未见S10OA14蛋白表达。4.C57小鼠SI00A了4基因的表达情况 Slo0AI4基因在不同日龄的C57小鼠胚胎及新生小鼠中的表达呈现如下趋郑州大学2003届硕士学位论文5100基因家族在人食管鳞癌中的差异表达及5100A14基因的进一步分析势:于11.5天时无表达;12.5天时表达开始出现;由12.5天至16.5天表达呈升高趋势，在16.5天时表达量达最高峰;而后，由16.5天至18.5天的小鼠胚胎直至新生小鼠，S了00A了4基因表达逐渐降低。了I00A了4基因于17.5天的小鼠胚胎、新生小鼠和成年雄鼠的不同脏器中的表达情况也表现出明显差异。其中在成年雄性小鼠中以食管的表达量为最高，除食管、胃肠、肺组织外，其它组织未见表达。在17.5天鼠胚和新生小鼠的肠与肺组织中，17.5天小鼠胚胎的脾脏组织中，51口0A14基因表达量均较高。结论:1.11个5100基因在食管鳞癌中的表达显著下调，1个基因在食管鳞癌中显著上调 (p<0.05)。这提示5 100基因家族与食管鳞癌的发生发展关系密切，5 100基因 家族中的某些显著下调基因很可能是一些重要的食管鳞癌相关基因。2.Slo0B基因的表达与食管鳞癌的组织分化程度显著相关(p=。.0247)。3.一些在食管鳞癌中表达失调的5100基因之间呈现显著相关〔p<0.05)，提示: 在正常食管上皮的形成或食管鳞癌的发生发展过程中，这些5100基因之间可能 存在某些相互作用。4.所研究的16个5100基因中，已知有13个5100基因定位于染色体lq21区带。 这13个基因中有10个在食管鳞癌中的表达显著失调。因而染色体lqZI区带可 能在食管鳞癌的形成过程中起重要作用。5.s100A了4基因及其编码的蛋白在人食管鳞癌中的表达均显著下调，提示该基因 及其蛋白很可能与食管鳞