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黄药子（Dioscorea bulbifera L.,DB）是已知的有毒中药,具有抗病毒、抗肿瘤、抗炎、抗菌等多重药理作用,但长期服用会导致严重的肝损伤,其用药安全性引起广泛关注。黄独素B（Diosbulbin B,DIOB）和8-表黄药子素E乙酸酯（8-epidiosbulbin E acetate,EEA）是DB的主要药效和毒效成分,在体内经肝脏细胞色素P450酶（Cytochrome P450,CYP）代谢活化、生成反应性中间产物而导致肝毒性。但DB的药代动力学和体外代谢性质,以及代谢产物的生成动力学,缺乏系统研究。为此,本课题评价了大鼠服用黄药子醇提物（Ethanol extract from Dioscorea bulbifera L.,EEDB）后DIOB和EEA的吸收、分布、排泄和药代动力学特征,研究了DIOB和EEA的体外肝代谢消除和种属差异,并考察了CYP酶介导的反应性产物/中间体生成动力学。本研究的结果有助于深入认识黄药子主要活性成分的体内外代谢处置特征、以及药效和毒性的物质基础,并为黄药子的临床合理用药和开发,提供科学依据和研究资料。本课题首先建立了同时定量检测黄药子活性成分DIOB和EEA的LC-MS/MS方法,方法学验证显示,其线性范围宽、基质效应低、灵敏度高,满足黄药子活性成分体内外代谢处置的研究要求。大鼠单次灌胃EEDB(1 g·kg-1)后,DIOB和EEA的吸收和消除迅速,血浆浓度在0.2 h达峰,消除半衰期t1/2分别为2.3和1.8 h。DIOB和EEA的口服生物利用度分别为23%和30%。给予等剂量的单体DIOB(1.3 mg·kg-1)后,活性成分药代动力学行为与EEDB给药相似,但峰浓度高于EEDB组,血浆消除也更快。在口服EEDB的大鼠,DIOB和EEA的96 h累积尿粪回收率分别为剂量的0.21%和1.41%。在胆管插管大鼠,DIOB和EEA原型72 h的累积胆汁排泄率仅为0.30%和0.25%,提示DIOB和EEA在体内可发生广泛的代谢转化,主要以产物形式消除。DIOB和EEA在Caco-2细胞模型的Papp（AP-BL）值均大于10×10-66 cm·s-1,为易透膜化合物。大鼠灌胃EEDB后,DIOB和EEA可迅速且广泛分布至各组织,大部分组织的分布浓度在0.17 h达到峰值,肝、肺和肾是其主要分布器官。DIOB和EEA与血浆和组织的蛋白结合率为2667%,组织蛋白结合率高于血浆。DIOB和EEA在肝、肺和肾的游离分布浓度高于血浆,其中DIOB的游离肺组织/血浆浓度比(Kp,AUC,?u)为4855,具有肺特异性分布的特征。DIOB和EEA在肝微粒体中主要发生CYP酶介导的代谢消除,并具有显著的种属差异,大鼠、小鼠和猴肝微粒体的内在清除率CLint均显著高于人肝。DIOB和EEA的氧化代谢由多个CYP酶介导,CYP3A4是主要的同工酶,对DIOB和EEA代谢的贡献率分别为68.55%和82.36%。将CYP3A抑制剂酮康唑与EEDB合用,可显著提高DIOB和EEA在大鼠的血浆和组织暴露水平。在加入谷胱甘肽（Glutathione,GSH）等捕获剂的肝微粒体孵育液中,应用LC-MS/MS方法可检测到多个DIOB和EEA的反应性中间体与捕获剂的结合产物。分别用底物消除法和产物生成法进行人和大鼠肝微粒体的酶动力学研究,结果显示,DIOB和EEA原型在大鼠肝微粒体的CLint显著高于人肝,消除也较快;但反应性产物在人肝微粒体的生成速率显著高于大鼠。综上所述,大鼠灌胃EEDB后,DIOB和EEA在体内吸收较快,主要在肝、肺和肾分布,消除半衰期短,口服生物利用度较好。原型的胆汁和尿粪累积排泄很低,主要经CYP3A酶代谢消除。DIOB和EEA的肝微粒体消除和反应性产物生成,有明显的种属差异,在将动物资料外推至人时,要关注其代谢消除的种属差异;临床应用时应关注CYP3A介导的药-药相互作用风险。