小菘菜(Brassica campestris L. ssp. chinensis (L.) Makino var.communis Tsen etLee]是十字花科(Cruciferae)芸薹属芸薹种不结球白菜亚种的一个变种。由于小菘菜为异花授粉植物,用常规方法进行田间育种,一般需要6-8代才能选育出理想的材料。但通过游离小孢子培养(Isolated Microspore Culture,IMC)这一技术不仅可以快速获得纯合的育种材料系统,缩短育种年限,提高育种效率,而且对新品种的选育和种质资源的开发起到非常大的作用。目前我国游离小孢子培养虽已取得了较大的进展,但是小孢子基因型间产胚率差异大及植株再生率低仍然是实际应用中的一大难题。本论文通过对选取的9份不同基因型的小菘菜为试材,对影响小孢子出胚率和植株再生率的因素以及小孢子再生植株染色体倍性的鉴定进行了研究,旨在建立高频稳定的小菘菜小孢子培养体系。主要研究结果如下：1.在影响小菘菜游离小孢子胚胎诱导率的因素方面：(1)基因型对小菘菜小孢子的胚胎发生能力起着决定性的作用；(2)不同基因型材料最适的花蕾长度有着一定的差异,小菘菜的花蕾长度在2.00-2.99mm时,小孢子单核靠边期的比例最大,获得的胚状体最多；(3)小菘菜游离小孢子培养最适的取材时期是在盛花期,初花期和末花期的小孢子胚胎诱导率低；(4)小菘菜最适的温度预处理组合为4℃低温处理1d+33℃高温热激处理1d。(5)不同的基因型对植物生长调节剂的反应不同。对于易出胚材料NHCC秋-633而言,在不添加任何激素的培养基中胚胎发生率最高；在1/2NLN培养基中添加0.05mg.L-16-BA和0.2mg.L-1NAA可以促进不能出胚的材料出胚。对于中出胚和难出胚的基因型,添加0.05mg.L-16-BA和0.1mg.L-1NAA胚胎诱导率最高。(6)前期用17%的高糖培养基处理小孢子1d后更换新鲜的13%的蔗糖培养基对小孢子的出胚率有促进作用。(7)用0.8mg.L-1的秋水仙碱处理小孢子1d后更换新鲜的1/2NLN培养基可显著提高小孢子的胚胎发生率。(8)在小孢子提取培养基中添加17%的高浓度蔗糖或8%的甘露醇可以提高小孢子的出胚率。2.在影响游离小孢子胚状体再生植株因素方面：(1)1.2%琼脂浓度的B5固体培养基最适合小孢子胚状体的萌发和植株再生。(2)子叶型胚在液体培养基中滞留时间越长,胚的成苗率越低,再生植株的玻璃化程度也越高。(3)培养基中添加3.0-4.0mg.L-1的AgNO3可以显著提高小孢子胚芽诱导率和平均出芽数,但AgNO3的浓度过高对胚芽的再生起抑制作用。3.在小菘菜小孢子再生植株的倍性鉴定方面：(1)小菘菜在小孢子培养过程中自然加倍率较高,单倍体的比率很低,仅是供体材料的10%～20%。(2)不同基因型供试材料的小孢子植株的倍性分布不同。NHCC秋-633中嵌合体的比例较高,达到60%,NHCC秋-607的胚再生植株中双单倍体占的比例最高,达到供试材料的50%。