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附子-干姜是温阳祛寒最常用的药对,源于《伤寒杂病论》的四逆汤。两药相伍常出现在各类方剂中,《伤寒论》中运用附子的32方中有10方与干姜相伍,亦有文献证明在研究附子与其他中药配伍规律时统计发现附子与干姜的配伍频率高达31.05%。课题以附子-干姜药对为研究对象,比较研究附子干姜配伍前后乌头类生物碱及姜辣素类体外溶出、乌头类生物碱在大鼠体内药动学和心脏药动学方面的差异,揭示附子-干姜药对配伍原理。1.采用高效液相色谱法分别测定了附子与干姜配伍前后4种乌头类生物碱成分(次乌头碱HA,苯甲酰乌头原碱BAC,苯甲酰次乌头原碱BHA和苯甲酰新乌头原碱BMA)及4种姜辣素类成分(6-姜酚,8-姜酚,6-姜烯酚和10-姜酚)的体外溶出。研究表明,附子与干姜共煎后,HA和BMA的溶出增多,BAC和BHA的溶出则稍有减少,4种总乌头类生物碱煎出总量呈增加趋势；并且可以不同程度地促进干姜中6-姜酚、8-姜酚、6-姜烯酚和10-姜酚的溶出。两药相伍后4种总乌头类生物碱和4种姜辣素成分的溶出量呈增大趋势。2.采用UFLC-MS/MS法,同时测定大鼠血浆中乌头碱(AC)、次乌头碱(HA)、新乌头碱(MA)、苯甲酰乌头原碱(BAC)、苯甲酰次乌头原碱(BHA)及苯甲酰新乌头原碱(BMA)等6种乌头类生物碱,色谱柱为Waters ACQUITY UPLC BEH C18柱(2.1×100mm,1.7μm),保护柱为BEH C18柱(2.1×5mm,1.7μm),流动相为甲醇-0.1%甲酸水(30：70,v/v),流速为0.2mL/min,进样量为2μL。采用多反应检测(MRM)扫描方式(AC、HA、MA、 BAC、BHA、BMA和内标物氢溴酸高乌甲素的[M+H]+m/z646.2→586.3,616.→556.2,632.2→572.3,604.1→105.1,574.1→542.1,590.1→105.1,585.2→162.1)。6种乌头类生物碱可在4.5min中即可完全分离,且无内源性物质干扰。各组分在相应范围内线性关系良好,R2≥0.9915,日间和日内精密度R.S.D.≤13.9%,各组分和内标的提取回收率均大于72.2%,R.S.D.≤17.0%,说明该测定方法具有灵敏度高、专属性强和快速的优点,符合生物样品分析要求。在此基础上,比较研究了灌胃给予附子水提液及附子-干姜水提液后大鼠体内药动学差异。以5.4g/kg灌胃剂量给药,分别于给药后5,10,15,30,45,60,90,120,180,300,480,720,1440min采集血样。结果发现,和单独给予附子水提液相比,给予附子-干姜水提物后,BAC、BHA和BMA的AUCo_t增大(p<0.05),BHA和BMA的T1/2延长(p<0.05),说明干姜可以增强BAC、BHA和BMA的吸收、延缓体内消除的趋势；而AC和HA的T1/2和AUCo-t均呈减小趋势(p<0.05),说明干姜具有抑制两者的吸收,加快两者者在体内的消除。3采用UFLC-MS/MS法,同时测定6种乌头类生物碱在心脏组织中的含量,各组分在相应范围内线性关系良好,R2≥0.9958,日间和日内精密度R.S.D.≤14.6%,各组分和内标的提取回收率均大于72.8%,R.S.D.≤11.2%。比较研究了灌胃给予附子及附子-干姜水提液后大鼠心脏药动学行为差异。结果发现,和单独给予附子水提物相比,给予附子-干姜水提物后,BAC、BHA和BMA的AUCo-t增大p<0.05),BAC和BHA的T1/2延长(p<0.05),说明干姜可以促进BAC、BHA和BMA向心脏的转运,延缓在心脏中的消除；而AC和HA的AUCo-t均呈减小趋势(p<0.05),说明干姜可以降低两者向心脏的转运。本文比较了附子与干姜配伍前后的体外溶出以及乌头类生物碱在大鼠体内和心脏药动学的差异。结果表明,附子、干姜配伍前后乌头类生物碱及姜辣素类成分溶出发生了一定的量变,总量有增大趋势。体内药动学研究表明,两药相伍后,具有延迟BAC、BHA和BMA在体内和心脏的消除,促进三者胃肠道吸收和向心脏的转运,同时可以抑制毒性较大的AC和HA的吸收的趋势,MA在体内和心脏的药动学在配伍前后变化不大。在体外溶出和体内药动学角度,揭示附子与干姜配伍具有增效减毒趋势。