蒙药白益母草生药学及抗炎活性研究

来源 :中央民族大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yzlang
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:蒙药白益母草为唇形科植物脓疮草属脓疮草(Panzerina alaschanica)干燥的地上部分,具有解毒消肿等功效,被蒙医视为疮疾圣药。白益母草为我国蒙古族医学体系中的经典药材,在蒙医理论的指导下有着悠久的用药历史。尽管这种药物被蒙医习用,但是由于蒙药白益母草的基原植物脓疮草种的分类方式上的分歧,继而导致了脓疮草种的生药学特征描述的差异。除花冠、花萼、花序、叶裂长短等描述的差异以外,脓疮草种的茎叶被毛程度的典型特征在《中国植物志》和《Flora of China》(《中国植物志》英文修订版)中的描述也明显不同。《中国植物志》中记载脓疮草种的茎叶被毛为多少被有白色绒毛,而《Flora of China》则记载茎叶密被白色绒毛。上述分类方式的不同,造成了蒙药白益母草基原植物脓疮草种特征和来源的不确定性,严重阻碍了蒙药白益母草的开发和利用。因此本文利用性状鉴定、显微鉴定、DNA分子标记鉴定和理化鉴定的生药学研究方法,对蒙药白益母草基原植物脓疮草及同属植物的性状与显微特征、分子遗传特征和化学成分进行表征分析。从而明确了蒙药白益母草的基原植物脓疮草的生药学特性,有助于该药用植物的资源扩大与开发,同时为该药用植物的质量评价提供科学指导。并且,由于蒙药白益母草自身的资源匮乏的限制,现有的研究又多集中在化学成分的基础研究上,对于白益母草药效活性的研究基本空白。因此,此课题根据书籍记载的白益母草解毒消肿的药效,在蒙医理论的指导下,利用小鼠背部气囊炎症模型和脂多糖诱导小鼠炎症模型,开展对蒙药白益母草抗炎活性的研究。为蒙药白益母草后续的开发利用提供参考信息。方法和结果:1.为方便区分表述,本文首先将采集到的白益母草的基原植物样本,按照《中国植物志》的分类方式将其分类为脓疮草(P.alaschanica)、甘肃脓疮草(P.kansu)ensis和小花脓疮草(P.parviflora)。由于该药用植物为蒙医多年习用,且在脓疮草属不同的分类方式下,脓疮草种的产地均含有内蒙古地区。故本课题以内蒙古产地为脓疮草种的参照,将其他样品与其比较分析。选取8个产地具有代表性的脓疮草属药材若干,按照《中国药典》2020年版一部附录药材检定通则,观察、测量和记录各部的形态特征,分析其性状。并利用生物显微镜观察镜下组织特征,用于蒙药白益母草基原植物的显微鉴别。结果显示,在性状特征上,根据花冠的长短、叶裂的程度和茎叶被毛的稀疏程度,使得小花脓疮草与其他两个种区分。根据茎的显微结构,维管束的大小、分布和密集程度,能够区分脓疮草属下三个种。继而明确蒙药白益母草的基原植物脓疮草的性状与显微特征,既茎叶被稀疏短绒毛,叶全裂达底部,花冠长度大于2 cm。茎的横切面的4面呈现凹凸不平的形状,四角厚角细胞发达,7~15层。2.利用DNA分子标记鉴定的方法,分析rbcL、matK、psbA trnH和ITS2 4种DNA序列特征,建立系统进化树。在明确蒙药白益母草的基原植物脓疮草的分子遗传学特征的同时,分析同属植物的遗传特征的差异。在4种DNA序列中,ITS2在3个种下未发现变异位点,psbA-trnH在205 bp和212 bp处的变异位点,可将甘肃脓疮草与其他两个种的药用植物区分开。rbcL序列在203 bp处的A-G变异,可以将小花脓疮草、甘肃脓疮草和宁夏产地的脓疮草与其他产地的脓疮草种区分开。matK序列在729 bp处的A-G变异,可区分小花脓疮草与另外两个种的药用植物。总体上分析,4种DNA序列的变异位点少,且从系统进化树的结果来看,脓疮草属下小分支的支持率均未超过63%,且遗传距离较近,对脓疮草、甘肃脓疮草和小花脓疮草的鉴定能力有限。3.利用高分辨质谱建立蒙药白益母草化学成分的指纹图谱。并且根据质谱裂解规律,参照标准品、化学成分数据库和相关文献,鉴定其中的化学成分。利用中药指纹图谱相似性分析软件和多元统计分析方法分析脓疮草属内的成分差异。结果显示,初步鉴定白益母草中的41个化合物,包括黄酮类、有机酸类、生物碱类和木脂素类成分。其中,13个化合物经标准品确认,24个化合物首次被报道。除小花脓疮草外,另外两个种的指纹图谱相似度大于0.97,主成分分析的结果也表明,小花脓疮草为离群的异常值,与另外两个种能明确区分开。相比于小花脓疮草,在蒙药白益母草的基原植物脓疮草中含有更多的水仙苷等黄酮类成分。4.根据定性分析的结果,选择其中具有生物活性的成分,建立1 1个黄酮类活性成分的定量分析方法,并将该方法应用于蒙药白益母草的定量分析中。定量分析方法的精密度为RSD<9.74%,重复率RSD<4.31%,稳定性RSD<5.22%。平均回收率范围是96.04%~104.14%,RSD值在2.14%~4.72%。结果表明,该方法准确、可靠。在蒙药白益母草的黄酮类成分定量结果中显示,水仙苷含量最高,其次为银椴苷。5.建立小鼠背部气囊角叉胶炎症模型(非抗原性)和脂多糖诱导小鼠炎症模型(抗原性),通过分析炎症介质引起的生理病理变化,包括小鼠背部气囊中的渗出液、蛋白含量和白细胞的变化;脂多糖诱导小鼠炎症模型中组织和外周血中炎症因子的变化、外周血中白细胞亚群的变化情况和血清中脂多糖含量等指标,考察药物的抗炎活性。结果表明,1%角叉胶诱导的小鼠背部气囊炎症模型中,24 h时模型组小鼠背部气囊渗出液蛋白含量和组织渗出液体积显著高于正常组,而给予白益母草总提物组的小鼠背部气囊渗出液中蛋白含量、组织液体积以及免疫细胞数量明显低于模型组。10 mg/kg脂多糖诱导小鼠炎症模型中,24 h时模型组外周血中性粒细胞升高为空白对照组的2倍左右,CD3+淋巴细胞显著下降至空白对照组的1/3左右,白益母草高剂量组明显抑制中性粒细胞升高,同时,可抑制CD3+淋巴细胞的下降。除IL-4外,在外周血中22个免疫相关的细胞因子均出现不同程度升高,在结肠、肺、肝、脾和肾等器官中,有14个因子同时出现升高,其余9个因子在不同脏器变化趋势并不一致。脏器对脂多糖的敏感性由强到弱为结肠>脾脏>肺脏>肝脏>肾脏。与模型组相比,白益母草高剂量组19个细胞因子表现为下降,趋向于空白对照组水平,在脏器中也表现出和外周血相似的变化,白益母草对脏器干预作用由强到弱的顺序为:结肠>肺脏>肾脏>肝脏>脾脏。受白益母草影响最大的细胞因子有IL-1β、MCP-1、IL-1α、KC、G-CSF、IL-6、IL-12(p40)和 TNF-α。另外,白益母草低、中、高剂量可以降低血清中脂多糖的含量,尤以高剂量表现显著。结论:本课题利用性状鉴别、显微鉴别、DNA分子鉴别和化学成分鉴别等生药学研究方法对脓疮草属植物进行综合表征,确定产于内蒙古、陕西、宁夏的脓疮草可作为蒙药白益母草药材的来源。由于小花脓疮草在成分上与脓疮草差异明显,故不宜将小花脓疮草作为蒙药白益母草药材的来源。甘肃脓疮草是否可作为白益母草入药尚需进一步研究。在抗炎活性方面,蒙药白益母草能够从免疫细胞和免疫细胞因子两方面的反向调节,减轻炎症相关反应的生理状态,表现出多维的抗炎作用。本研究为蒙药白益母草的开发利用和质量评价提供参考依据。
其他文献
学位
学位
卢梭是法国大革命的思想先驱,是18世纪启蒙运动最杰出的代表人物之一。卢梭所著《社会契约论》是资产阶级民主革命中具有指导性的理论思想著作。卢梭提出的从“天赋人权”出发的自由平等的人权思想,起到了开创性的作用。在卢梭的人权思想中,最终目标是建立一个能够实现人的自由平等的社会契约,理论前提是天赋人权,公意理论和人民主权是其学说的核心。在对马克思思想的来源研究中,虽然学术界大多认为马克思继承了德国古典哲学
1959年,罗素提出维特根斯坦Ⅰ和维特根斯坦Ⅱ的划分。人们普遍接受了这种划分。我们通常也把这种划分称为前期维特根斯坦和后期维特根斯坦。在此划分基础上,本文将维特根斯坦以《逻辑哲学论》为代表的前期思想和以《哲学研究》为代表的后期思想进行比较,并着重关注其哲学观,探究其前后期思想的一致性。文章分四部分进行论述。第一部分,对维特根斯坦思想的划分情况做简单概述。第二部分,论述维特根斯坦前期哲学观:哲学非理
格论作为抽象代数的一个分支,是定义在集合系统上的逻辑运算。它的成型标志是美国数学家Garrett Birkhoff在1937-1939年所撰巨著《Lattice Theory》。经过近80年的发展,格论已经发展成为一门独立的数学学科,在抽象代数、射影几何、拓扑学、点集论、数论、逻辑和概率论等诸多领域有着广泛应用。格论中有分配格,模格,半模格,原子格,代数格等许多类型,这些类型的格之间存在着包含关系
学位
学位
高层建筑整体规模较大,运行会消耗大量的能源,因此建筑节能技术十分关键,需要采用科学的节能技术降低高层建筑运行整体能源消耗。随着绿色建筑理念的发展,多种节能技术在高层建筑中得以应用,但是总体来看还没有取得较好的效果。因此,文章对高层住宅中建筑节能技术的应用进行了深入研究与分析,并提出了一些合理的意见和优化措施,旨在进一步加强高层建筑节能技术的应用效果,降低高层建筑运行能源消耗量。
近年来,绿色建筑理念得到推广普及,在高层住宅建筑领域中,绿色建筑理念强调维持建筑室内外环境的平衡关系,创造人与自然和谐共生的高质量居住环境,这对住宅建筑可持续发展目标的实现有重要的现实意义。为加快绿色建筑的发展步伐,打造高质量住宅建筑,文章对绿色建筑进行分析,阐述高层住宅建筑设计中的绿色建筑设计原则及具体策略,以供参考。