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目的通过检测正常人、胃上皮内瘤变、胃癌和胃癌术后患者血浆中联合多基因的DNA甲基化水平,研究ZIC1,HOXD10和RUNX3在胃上皮细胞癌变过程中的基因甲基化动态变化,探究血液基因甲基化作为一种无创分子标记物在胃癌前病变和胃癌诊断及癌变监测中的价值。方法收集正常健康人群、胃上皮内瘤变、胃癌和胃癌术后患者血浆样本,记录患者年龄、性别、幽门螺杆菌(Hp)感染、病理分期分型等临床病理资料。用甲基化特异性PCR(MSP)检测ZIC1,HOXD10和RUNX3在血浆中的甲基化阳性率,分析外周血DNA甲基化水平在胃癌发生发展中不同阶段的变化情况,使用Fisher和Logistic回归方法统计分析ZICl,HOXD10和RUNX3甲基化水平与患者临床病理特征的相关性,利用ROC曲线分析对疾病诊断和预后判断的价值。结果(1)共纳入234例研究对象,包括正常的健康对照38例,平均年龄47.18±15.12岁;胃上皮内瘤变患者56例,平均年龄59.71±10.62岁;胃癌临床患者123例(40例早期胃癌和83例进展期胃癌),平均年龄63.7±9.38岁;胃癌术后患者17例,平均年龄59.75±9.75。各组间年龄及性别构成无统计学差异(P>0.05)。(2)ZIC1、HOXD10和RUNX3在上皮内瘤变组外周血中的启动子甲基化阳性率分别是51.79%、33.92%、37.50%;在早期胃癌组中的阳性率分别为67.50%、30.00%和54.21%;在进展期胃癌组中的阳性率分别为72.29%、54.21%和40.96%;正常对照组中上述基因均未见阳性甲基化现象。胃癌患者ZIC1的甲基化水平较胃上皮内瘤变组中有显著升高(P<0.05),HOXD10甲基化在早期和进展期胃癌之间具有统计学差异(P<0.05),且HOXD10在术后患者中外周血甲基化阳性率为17.65%,显著低于胃癌组中的阳性率(P＜0.05)。(3)胃癌患者外周血浆中ZIC1、HOXD10和RUNX3的甲基化阳性与否和患者的性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、分化程度、淋巴结转移情况、TNM分期、CEA水平和Hp感染情况之间无显著性关联(P>0.05)。其中仅HOXD10的甲基化阳性与否同肿瘤的浸润深度呈正相关(OR=0.2518;95%CI:1.123-5.645,P=0.023)。(4)联合检测外周血浆中ZIC1、HOXD10和RUNX3的甲基化水平可以提高胃病变(胃癌+癌前病变)诊断的敏感性,三者联合最高可达89.4%。在胃癌患者中,ZIC1 检测的敏感性为 70.7%,高于 HOXD10(46.3%)和 RUNX3(42.3%),HOXD10 的诊断特异性(79.8%)高于 ZIC1(69.1%)和 RUNX3(78.7%)。联合检测ZIC1和HOXD10的诊断敏感性为83.1%,特异性为58.5%,AUC为0.703,对胃癌的诊断价值要均高于任一单独指标或其他联合方式检测。结论联合检测外周血浆中ZICl、HOXD10和RUNX3启动子的甲基化水平有望成为胃癌诊断的特异性方法,有助于胃癌高危人群的筛查、早期胃癌的诊断、胃癌癌变过程的监测及术后疗效的判断。