【摘 要】
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目的:阐明胃癌细胞来源的exosomes在香烟烟雾促进胃癌发展中的作用,探讨exosomes携载的hsa-circ RNA-000670（circ0000670）在香烟烟雾促进胃癌发展中的作用机制,研究香烟烟雾促进胃癌发展的新机制。方法:建立胃癌细胞HGC-27和AGS的体外香烟烟雾暴露模型,提取香烟烟雾提取物处理的胃癌细胞分泌的exosomes,并对其进行鉴定;采用胃癌细胞exosomes处理人
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目的:阐明胃癌细胞来源的exosomes在香烟烟雾促进胃癌发展中的作用,探讨exosomes携载的hsa-circ RNA-000670（circ0000670）在香烟烟雾促进胃癌发展中的作用机制,研究香烟烟雾促进胃癌发展的新机制。方法:建立胃癌细胞HGC-27和AGS的体外香烟烟雾暴露模型,提取香烟烟雾提取物处理的胃癌细胞分泌的exosomes,并对其进行鉴定;采用胃癌细胞exosomes处理人胃粘膜上皮细胞（GES-1细胞）,利用蛋白印迹、荧光标记、平板克隆和transwell实验等检测exosomes对GES-1细胞的迁移能力、细胞增殖及EMT进程的影响;检测circ0000670在香烟烟雾处理的胃癌细胞分泌的exosomes中的表达;采用香烟烟雾提取物和特异性circ0000670低/高表达慢病毒单独或联合处理胃癌细胞,提取exosomes,实时定量PCR和蛋白印迹检测慢病毒处理前后exosomes对胃癌细胞的Wnt/β-catenin通路活性的影响;用获得的exosomes处理GES-1细胞,观察敲减/过表达circ0000670对香烟烟雾通过exosomes途径促进GES-1细胞增殖和EMT标志物表达的影响。结果:香烟烟雾对HGC-27和AGS细胞exosomes形态、粒径和标记蛋白的表达无明显影响;蛋白印迹、平板克隆和transwell实验显示香烟烟雾可以促进胃癌细胞（HGC-27和AGS）的干性和EMT进展,以及香烟烟雾诱导的胃癌细胞exosomes可以促进GES-1细胞的迁移能力、细胞增殖能力及EMT进程;circ0000670敲减慢病毒处理胃癌细胞后,Wnt/β-catenin通路受到了抑制作用,exosomes的促胃癌效应被抑制,细胞增殖和EMT标志物的表达下调;而当circ0000670过表达慢病毒处理胃癌细胞后,Wnt/β-catenin通路活性增强,exosomes的促胃癌效应被增强,细胞增殖和EMT标志物的表达增加。结论:香烟烟雾提取物可以通过上调胃癌细胞来源exosomes内circ0000670的表达,调控Wnt/β-catenin通路促进胃癌的发展。
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