【摘 要】
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2017年,H7N9亚型禽流感病毒由低致病性变异为高致病性病毒。同年我国使用H5+H7二价灭活疫苗（H7-Re1株）,有效控制了H7N9病毒在禽间和人间的传播。2018年,H7-Re1疫苗株被H7-Re2疫苗株替代,2020年,又更新为H7-Re3疫苗株。但是,2019年以来,H7N9病毒不断变异,在一些地区导致病例出现。疫苗作为重要防疫工具,在H7N9亚型禽流感防控中起到了至关重要的作用,但是目
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2017年,H7N9亚型禽流感病毒由低致病性变异为高致病性病毒。同年我国使用H5+H7二价灭活疫苗（H7-Re1株）,有效控制了H7N9病毒在禽间和人间的传播。2018年,H7-Re1疫苗株被H7-Re2疫苗株替代,2020年,又更新为H7-Re3疫苗株。但是,2019年以来,H7N9病毒不断变异,在一些地区导致病例出现。疫苗作为重要防疫工具,在H7N9亚型禽流感防控中起到了至关重要的作用,但是目前H7N9病毒仍在持续进化变异中,防控的压力级难度可能未降而反增,需要持续跟踪监测并开展相关疫苗的研究储备。本研究在2020年1月至2021年4月共分离到13株H7N9亚型禽流感病毒。HA序列分析,发现13株病毒氨基酸同源性在97.2%-98.0%之间,HA存在Q226L和G186V位置的突变组合。按照单个基因片段同源性＞95%作为界限划分基因型,13株H7N9病毒可分为2个基因型,其中12株属G2基因型;CK/TS0328/21株NS及NP基因与其他12株病毒核苷酸同源性位分别为93.40%-95.3%、93.0%-93.6%,遗传进化显示其NS及NP基因来自H9N2的内部基因,与其他12株病毒不同,单独占一个group。提示CK/TS0328/21株可能是H7N9与H9N2病毒内部基因重组出现新的基因型（G11）。抗原性分析结果表明,13株H7N9病毒与H7-Re3抗血清反应性较差,不同年份分离株在与相对应血清反应性上出现差异,13株H7N9病毒分为3个抗原组,其中H7-Re3疫苗株处于第Ⅰ组,虽然处于同一抗原群,但H7-Re3抗血清与其他H7N9病毒反应,HI抗体滴度相比同源毒株相差2 log2。根据抗原图谱分析,在每个抗原组挑选了1株H7N9病毒,对H7-Re3疫苗株免疫效力进行了评估,发现H7-Re3疫苗株对攻毒毒株只能提供70%～80%的致死保护。基于HI试验结果,将选取A/chicken/Shanxi/HY1027/2020作为亲本毒,以A/Puerto Rico/8/34（PR8）的内部基因为骨架,利用反向遗传操作技术成功拯救了一株H7N9重组病毒,命名为r HY1027株。选取该株F6代制备灭活疫苗进行免疫效力试验,结果显示,r HY1027灭活疫苗免疫SPF鸡,免疫后21d免疫组HI抗体均在8 log2左右,免疫后150d HI抗体仍能达到5 log2以上。攻毒保护试验结果显示,用不同抗原群的H7N9毒株攻击,免疫组均不发病,不排毒,可对鸡形成100%保护。本研究为H7N9亚型禽流感进行有效防控工作提供基础数据和技术储备。
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