研究背景及目的寨卡病毒属于黄病毒,黄病毒感染可能与一些神经性疾病相关,比如先天性小头症和格林巴利综合征等。目前,临床上没有药物或疫苗对寨卡病毒或其它黄病毒感染导致的疾病进行有效的治疗或预防。黄病毒NS3蛋白具有蛋白酶活性,可以将病毒的前体多聚蛋白切割为多个独立的病毒蛋白,因此NS3蛋白成为备受关注的抗病毒药物靶标。尽管目前已解析出寨卡病毒NS2B-NS3蛋白酶的晶体结构,但是在寨卡病毒复制时,NS2B如何影响NS3蛋白的功能目前仍不十分清楚。我们旨在探究寨卡病毒NS2B对NS3功能的影响。方法、内容与结果我们在HeLa细胞中单独表达NS3蛋白时,免疫荧光结果显示NS3定位在线粒体。然而,在寨卡病毒感染的HeLa细胞中,NS3定位在内质网。进一步的结果显示NS2B可以将NS3从线粒体募集到内质网,并且这一募集作用主要是由NS2B的羧基端与NS3蛋白酶结构域相互作用引起。我们根据NS2B-NS3蛋白酶的晶体结构,找到了影响这两种蛋白相互作用的关键氨基酸,并在NS2B上引入了突变。与野生型NS2B相比,部分NS2B突变体明显减弱了对NS3的募集作用,并且NS2B-NS3突变体的蛋白酶活性也减弱或丧失,从而导致寨卡病毒的复制和组装受到严重影响。结论和意义我们的研究证明了寨卡病毒NS2B对于NS3的募集、蛋白酶活性以及病毒的复制和组装至关重要,有助于阐明寨卡病毒的非结构蛋白在病毒复制过程中的作用以及为新的抗病毒药物和疫苗的研发提供思路。