Toll样受体7及9在系统性红斑狼疮患者外周血B淋巴细胞内的表达及其意义

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背景:系统性红斑狼疮(Systemic Lupus Erythematosus, SLE)是一种系统性自身免疫病。其病因不明,一般认为与遗传和环境因素有关。其中病毒及细菌感染在SLE的发生及复发中起着重要的作用。Toll样受体(Toll-like receptors, TLRs)作为一种模式识别受体,在固有免疫中起主要作用。新近发现 TLRs(尤其是 TLR7和 TLR9)还与自身免疫关系密切,成为连接固有免疫和获得性免疫的桥梁。Toll样受体的深入研究将有助于对SLE发病机制的了解,并为治疗提供新的思路。目的:了解TLR7和TLR9在正常人及系统性红斑狼疮患者外周血B淋巴细胞内的表达情况;比较正常对照组和患者组TLR7和TLR9表达的差异;分析TLR7和TLR9表达水平与患者临床病情的相关性。  方法:选取SLE患者50例及健康对照组30例作为观察对象。取外周血细胞进行表面和细胞内荧光染色,应用流式细胞术分别检测CD19+ B淋巴细胞中TLR7和TLR9阳性细胞所占比例及平均荧光强度(mean fluorescence intensity, MFI),比较两组表达的差异。收集患者临床资料并计算 SLE疾病活动指数(SLE Disease Aetivity Index, SLEDAI)评分。根据SLEDAI评分将SLE患者组分为轻度活动组(18例,SLEDAI评分<10)和中重度活动组(32例,SLEDAI评分≥10),分别比较正常对照组、轻度活动组和中重度活动组三组间TLR7、TLR9表达水平的差异。最后将TLR7、TLR9表达水平分别与血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)、尿蛋白定量、补体3(C3)、补体4(C4)、抗ds-DNA半定量和SLEDAI评分等临床资料进行相关性分析。  结果:应用流式细胞仪对50例SLE患者的测定结果显示:1. SLE患者外周血CD19+B淋巴细胞中TLR7+细胞所占比例为14.95±12.69(%),高于正常对照组9.42±8.60(%)(P=0.039);平均荧光强度为27.63±15.59(道),与正常对照组23.84±7.71(道)差异无统计学意义(P=0.870)。TLR9+细胞所占比例为8.95±6.37(%),高于正常对照组3.45±2.33(%)(P<0.001);平均荧光强度为21.91±13.12(道),与正常对照组21.29±6.99(道)差异无统计学意义(P=0.245)。2.将患者组按SLEDAI分为轻度活动组与中重度活动组,其中TLR7+细胞的比例在中重度活动组和正常对照组之间差异有统计学意义(17.54±13.67 vs9.42±8.60, P=0.008),余各组间差异无统计学意义(均P>0.05)。TLR7+细胞的MFI在各组间差异无统计学意义(均P>0.05)。其中TLR9+细胞的比例在轻度活动组和正常对照组之间(6.15±4.20 vs3.45±2.33, P=0.019)、中重度活动组和正常对照组之间(10.52±6.89 vs3.45±2.33, P<0.001)、中重度活动组和轻度活动组之间(10.52±6.89 vs6.15±4.20, P=0.018)差异均有统计学意义。TLR9+细胞的MFI在各组间差异无统计学意义(均P>0.05)。3. TLR7表达与临床资料的相关性:TLR7+细胞的比例与患者ESR呈正相关,相关系数r=0.309(P=0.047);与患者补体C3呈负相关,r=﹣0.397(P=0.010);与SLEDAI呈正相关,r=0.411(P=0.003)。与24h尿蛋白定量、补体C4定量、ANA半定量、dsDNA半定量、CRP、血清IgG定量等临床资料无明显相关性(均P>0.05)。4. TLR9表达与临床资料的相关性:TLR9+细胞的比例与患者尿蛋白半定量成正相关,r=0.305(P=0.039);与SLEDAI呈正相关,r=0.343(P=0.015)。TLR9+细胞的MFI与患者24h尿蛋白定量呈正相关, r=0.369(P=0.041);与患者补体C3呈负相关,r=-0.523(P<0.001)。与ESR、补体C4定量、ANA半定量、dsDNA半定量、CRP、血清IgG定量等临床资料无明显相关性(均P>0.05)。  结论:1. TLR7及TLR9在SLE患者外周血B淋巴细胞内表达均上调。2. TLR7表达水平与ESR和SLEDAI呈正相关,与C3呈负相关;TLR9表达水平与尿蛋白定量和SLEDAI呈正相关,与C3呈负相关。3. TLR7及TLR9在SLE患者外周血B淋巴细胞内表达水平可作为判断SLE患者疾病活动度的参考指标。
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