鸡球虫的分离鉴定及预防鸡球虫病中草药复方制剂的研究

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鸡球虫病是由艾美耳属一种或多种球虫寄生于鸡体内所引起的呈世界性分布的寄生虫病,该病对雏鸡的危害十分严重,给养鸡业造成了巨大的经济损失。鸡球虫种类多,且临床多呈混合感染,其中致病性最强的是柔嫩艾美耳球虫。本研究从病鸡盲肠内分离球虫,并采用形态学方法进行鉴定:通过研究单味中草药对球虫孢子生殖的影响,筛选出具有抗球虫活性的中草药,根据单味中草药筛选结果、球虫生物学特性及鸡的生理特点,研制预防鸡球虫病的中草药复方制剂,并对中草药复方制剂抗球虫效果进行研究。首先,从合肥市肥西县选择具有盲肠球虫病典型症状的病鸡,取其盲肠内容物,用沉浮法收集柔嫩艾美耳球虫的野外混合株,加入适量的2.5%重铬酸钾水溶液,置于29℃恒温培养箱中培养。在实验室内进行人工鸡体增殖,查阅有关资料,分别对野外检获和鸡体增殖后的两代球虫卵囊进行形态学鉴定。测得第一代(n=50个)卵囊的大小为18.4~25.5μm×14.6~20.2μm,平均大小为21.62±2.08μm×18,15±1.83μm。卵形指数为1.19。孢子囊大小为10.5~12.6μm×5.1~6.8μm,平均大小为11.77±0.87μm×6.29±0.69μm。第二代(n=50个)卵囊的大小为19.5~26.2μm×16.5~21.5μm,平均大小为22.05±1.98μm×18.58±1.85μm,卵形指数为1.18,孢子囊大小为10.4~12.8μm×4.8~7.5μm,平均大小为11.85±0.91μm×6.31±0.72μm。对两代孢子化卵囊的测量数据进行差异显著性检验(F检验),其结果差异不显著,而且第二代球虫的寄生部位和病理变化与第一代相同,符合柔嫩艾美耳球虫的特征,因此初步鉴定本试验分离的球虫为柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)。其次,选取苦参、槟榔、川楝子、鹤虱、贯众等23味中草药,进行单味中草药对柔嫩艾美耳球虫孢子生殖影响的研究。按照中草药制剂研制工艺,分别将每味中草药研制成浓度在1.1~1.15 g/mL的浓缩提取液,对其体外抑制球虫卵囊孢子化的效果进行观察,筛选出商陆、常山、柴胡、白头翁等抑制球虫卵囊孢子化作用较强的中草药。再次,从单味中草药体外抑制球虫卵囊孢子化试验的结果中筛选出研制复方制剂的主药,结合球虫的生物学特性和鸡的生理特点,再根据中医药理论的组方配伍原则进行组方。第一次组方经鸡体试验,根据试验结果对组方进行调整。第二次组方再经鸡体试验,根据试验结果又对组方进行适当加减,并进行第三次鸡体试验。通过三次鸡体试验筛选出一个预防鸡球虫病效果较好的组方,该组方由商陆8份、白头翁4份、常山2份、仙鹤草3份、金银花3份等组成,其综合抗球虫指数(ACI)达到188.1,抗球虫效果优于化学合成药氨丙啉(对照组氨丙啉ACI为182.1)。最后,进行了中草药复方制剂疗效试验。以柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊接种雏鸡,研究中草药复方制剂对球虫感染鸡血液生理生化指标的影响。结果表明,除血液超氧化物岐化酶变化不明显外,球虫感染后,引起鸡血清葡萄糖、镁、钠、总蛋白、白蛋白、琥珀酸脱氢酶、淀粉酶、碱性磷酸酶含量明显下降;血清钙、一氧化氮、溶菌酶、谷草转氨酶、谷丙转氨酶含量升高;鸡体产生免疫应答,IgG、IgM、IgA含量升高。中草药能够维持血糖等指标稳定在较正常水平,并能明显提高溶菌酶等指标的水平。同时,还进行了中草药复方制剂预防鸡球虫病田间试验,结果表明,中草药复方制剂能够明显降低鸡球虫病的发病率和死亡率,还能够显著促进雏鸡生长,提高饲料转化率。综上所述,本研究成功地分离并鉴定出柔嫩艾美耳球虫,研制出一个预防鸡球虫病的中草药复方制剂。所研制的中草药复方制剂不仅具有较好的抗球虫效果,而且能够促进雏鸡生长,提高饲料转化率。因此,本研究为鸡球虫病的预防探索了一条新途径,对提高养鸡业经济效益及保障鸡(肉、蛋)产品的安全具有一定意义。
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