Disabled-1 (Dab1)是Reelin信号途径中的一个重要接头蛋白,参与调控神经元的迁移和分化。Fyn是Src酪氨酸激酶家族(SFK)的成员之一,在Dab1分子的酪氨酸磷酸化从而使信号放大的过程中具有重要作用。Fyn作为一种非受体酪氨酸蛋白激酶与细胞内多条信号转导途径相关,参与调控细胞的迁移、增值、分化、运动及生长等生物学功能,这些细胞过程都与细胞骨架重排的信号调控紧密相关,但Fyn是如何参与调控细胞骨架的重组,而使细胞形态及功能发生改变,目前尚待深入研究。本研究中使用RT-PCR、点突变、超表达、免疫细胞化学及Western blotting等方法,在克隆猪Dab1和Fyn及不同变体的基础上,深入研究了其分子相互作用所介导的细胞骨架重排及细胞形态与功能的变化,结果如下：1.分离克隆了猪Dab1和Fyn的不同剪接体,其中从大脑皮层中获得sDab1和sFyn-B、从肝脏中获得sDab1-Li、从脾脏中获得sFyn-T;进一步分析了各自的剪接模式。2.用猪-仓鼠体细胞辐射杂种板将猪Dab1定位于6q31-35；Fyn定位于1p13。3.用实时荧光定量PCR方法对猪Dab1和Fyn不同剪接体的组织表达谱分析表明,sDab1在神经组织、sDab1-Li在外周组织、sFyn-B在神经组织、sFyn-T在免疫组织中高表达。猪大脑皮层和小脑中sDab1和sFyn-B呈现相似的时空表达模式。4.猪Dab1的两个剪接体均具有核质穿梭的特性。5.在体外,sFyn-B可磷酸化sDab1分子中Tyr185、Tyr198/200和Tyr232,磷酸化sDab1-Li分子中的Tyr185和Tyr197(对应于sDab1的Tyr232)。因此,sDab1-Li可能在信号调控中作为sDab1的负调控分子。6.在离体细胞中超表达猪Fyn基因导致细胞形态发生变化,主要表现为细胞伪足状突起的生成。这种变化与细胞肌动蛋白骨架重排相关,该过程取决于Fyn蛋白中SH2和SH3结构域相关的分子互作及其自身的磷酸化修饰和蛋白共价修饰。Fyn的活性是其介导细胞骨架重排的先决条件；Fyn的准确亚细胞定位也至关重要,SH2和SH3结构域指导Fyn蛋白的定位,对其活性并无影响；Fyn蛋白N端的蛋白质共价修饰决定其是否能被活化。7.Fyn与粘着斑结合并使粘着斑激酶(FAK)的Tyr861和Tyr925发生磷酸化而活化,从而触发肌动蛋白骨架的重组反应。Reelin的刺激可以使FAK第861位酪氨酸磷酸化增强,这个过程可被SFKs的特异性抑制剂PP2所抑制,因此,Reelin可能是通过Fyn-FAK途径来调控树突棘的形态学改变。8.在原代培养的海马神经元中Fyn促进树突的分枝；在成熟海马脑片CA3区的锥体神经元中导致树突棘密度增加,而树突棘密度增加与Fyn蛋白的激酶活性和SH3结构域密切相关。