补肾化石汤治疗肾结石的实验研究

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目的:通过给大鼠饮用含1%的乙二醇加1%氯化铵的自来水造成含草酸钙结石的大鼠肾结石(Nephroplithiasis)模型。并应用补肾化石汤对该模型进行干预性治疗,观察对大鼠肾结石模型的湿肾组织中草酸和钙的含量、肾结石程度及成石率、血清Mg2+、Ca2+、BUN、Cr含量、肾脏病理形态学的影响,探讨补肾化石汤对大鼠肾结石(Nephroplithiasis)的疗效及可能的治疗机理,为临床应用提供实验及理论依据。方法:选用雄性SD大鼠40只,体重(200±20g),经普通饲料适应性饲养一周后随机分为4组,正常组、模型组、补肾化石汤组、排石颗粒组,四组除正常组外,其余皆造模,大鼠饮用含1%的乙二醇加1%氯化铵的自来水,造模周期为5周,造成含草酸钙结石的大鼠肾结石模型。造模一周后开始给药,给药的同时继续给予造模药。每日上午8时开始灌胃,正常组和模型组给予等量的蒸馏水灌胃,补肾化石汤组给予中药浓煎剂2ml灌胃,每毫升相当于2.89g生药量,排石颗粒组给予排石颗粒冲剂2ml灌胃,临用前用温水冲配成0.54 g/ml的冲剂用时摇匀。给药四周后处死大鼠,腹腔静脉穿刺取血,用全自动生化分析仪检测各组SD大鼠血清Mg2+、Ca2+、BUN、Cr含量。取肾组织一部分在光镜、电镜下观察其病理变化,另一部分检测肾组织中草酸、钙的含量。结果:(1)对大鼠肾组织草酸、钙含量的影响:与正常组相比,模型组肾钙含量和草酸含量显著升高(P<0.01);补肾化石汤组与模型组相比,其肾钙含量和草酸含量均显著下降(p<0.01),排石颗粒组与模型组相比其肾钙含量和草酸含量均显著下降(p<0.01),但补肾化石汤组在降低肾钙含量和草酸含量方面明显优于排石颗粒组(p<0.01)。(2)大鼠血清生化指标的影响:与正常组相比,模型组BUN,Cr,显著升高(P<0.01);与模型组相比补肾化石汤组大鼠血清BUN,Cr,Ca2+明显低于模型组(p<0.01),Mg2+含量高于模型组(p<0.01);而排石颗粒组血清BUN,Ca2+低于模型组(p<0.05),Mg2+高于模型组(p<0.05);与排石颗粒组相比,补肾化石汤组血清BUN,Cr,明显低于排石颗粒组(p<0.01),Mg2+高于排石颗粒组(p<0.05)。(3)各组大鼠肾结石程度及成石率比较:正常组肾组织无结晶形成,模型组大鼠肾实质内均有大量草酸钙结石,绝大多数肾有成堆的结石分布,结晶散在不连接,个别结晶成堆而且互相连接,成石率为100%;补肾化石汤组和排石颗粒组部分肾脏有少量散在结晶沉淀物或有小的游离结晶,成石率为37.5%和50%。说明给予补肾化石汤可以防止乙二醇诱发肾结石的形成,从而使补肾化石汤组大鼠结石的形成率降低(p<0.05),差别具有极显著性意义,在成石率和结石行成的程度方面补肾化石汤组比排石颗粒组相对低,但差异无显著意义。(4)肾组织病理形态学观察:与正常组相比,光镜下模型组肾小管萎缩,管腔明显扩张,上皮细胞水肿,管腔形状不规则,腔内可见较多的紫蓝色草酸钙结晶及上皮细胞坏死物,间质内可见大量慢性炎性细胞浸润。电镜下可见肾近曲小管表面微绒毛数线量明显减少,排列紊乱,线粒体部分嵴与膜溶合或消失。粗面内质网扩大,有明显脱颗粒现象,细胞间连接变宽。补肾化石汤组光镜电镜检查可见大鼠肾小管扩张不如模型组明显,上皮细胞轻度水肿,肾小管内紫蓝色草酸钙结晶少见,分布局限,间质及管腔可见少量慢性炎症细胞。近曲小管游离面大量排列细长整齐的微绒毛,线粒体少部分嵴与膜溶合或消失,粗面内质网轻度脱颗粒现象,与模型组相比病变明显减轻,与排石颗粒组相比,差别明显。结论:补肾化石汤具有整体调节优势,在有效抑制结石形成,减轻或消除症状,防止梗阻、疼痛的同时,还增加了尿量,排石,一定程度地溶石、化石,保护肾小管细胞、防止细胞损伤变性、坏死。血清生化指标提示补肾化石汤能降低肾结石大鼠血清肌酐和尿素氮,改善肾小球的滤过功能,有效保护肾功能。总体效果优于排石颗粒并在某些方面有一定优势,这表明本方对防治肾结石及其并发症均有疗效,具体机理尚有待进一步研究。
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