锌对体外培养胎鼠腭突发育影响的初步研究

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目的:了解不同浓度锌对体外培养鼠腭胚突发育的影响,探索出适合鼠腭胚突发育的最佳锌浓度;建立全反式维甲酸诱导的体外培养腭裂模型,探寻锌在全反式维甲酸诱导的胎鼠腭裂发生过程中的拮抗作用。方法:获取胚胎13天C57BL/6N胎鼠腭突进行体外培养,根据不同的干预因素将培养的腭胚突分为空白对照组(A组:ZNO}μmol/L)、低锌组(B组:ZN50μmol/L)、中锌组(C组:ZN75μmol/L)、高锌组(D组:ZN95μmol/L),对比分析不同浓度锌对体外培养腭胚突融合的影响。根据前面获得的促进腭胚突融合的最佳锌浓度,了解全反式维甲酸组(E组ATRA10μmol/L)和全反式维甲酸(ATRA10μmol/L)+最适锌浓度(F组)对腭胚突融合的影响,培养24小时、48小时后取出腭胚突,体式显微镜下观察其形态学变化并计录腭胚突融合情况,培养48小时后进行HE染色了解其融合过程。结果:A、B、C、D、E、F组腭胚突融合率分别为27.8%、53.9%、85%、32%、0%和6.7%。A、B、C、D各组之间进行两两比较并行χ2检验后发现,A组、B组和D组之间腭胚突融合率无显著的差异(P>0.05),而C组与各组之间差异显著(P<0.05),ZN75μmol/L有明显促进腭突融合的作用,是各体外培养腭胚突融合中的最佳浓度。F组的腭裂发生率虽较E组低,但E组与F组间统计学上无明显差异(P>0.05)。结论:(1)腭器官体外培养基本可以重复体内腭突接触融合过程。(2)锌浓度对腭胚突的发育有影响,75μmol/L的锌浓度能有效地促进腭胚突的融合,其为体外培养的最佳锌浓度。(3)成功建立了全反式维甲酸诱导的小鼠体外腭裂模型,75μmol/L的锌对10μmol/L的全反式维甲酸诱导的腭裂没有拮抗作用。
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