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目的：肌成纤维细胞上清液配置成的条件培养基，处理胚胎肝干细胞，诱导其增殖分化。探讨激活后的成纤维细胞是否可以促进胚胎肝细胞分化为有功能的成熟肝细胞，拟为激活的成纤维细胞与胚胎肝细胞联合移植提供理论依据。方法：用Hepa1-6上清液，体外激活提取的成纤维细胞，收集普通成纤维细胞上清及激活后的肌成纤维细胞上清，分别配置成两组条件培养液（CMFb和CMAFb）。HP14.5胚胎肝细胞培养分为三组：DMEM普通培养液处理组（DMEM组）、CMFb培养液处理组（CMFb组）及CMFAb培养液处理组（CMAFb组）。免疫荧光法检测成纤维细胞α-SMA的蛋白表达情况；MTT法测定三组HP14.5胚胎肝干细胞细胞生长情况并绘制曲线图；免疫荧光法及Real-Time PCR法分别检测三组HP14.5胚胎肝细胞中白蛋白（ALB）、甲胎蛋白（AFP）、细胞角蛋白18（CK18）等肝细胞特殊标记物的蛋白及mRNA表达情况，PAS糖原染色法检测三组HP14.5胚胎肝细胞中糖原分泌的功能情况。结果：免疫荧光法显示Hepa1-6肝癌细胞上清液在体外能将成纤维细胞激活为以α-SMA为特殊标志物的活化成纤维细胞；MTT法检测结果显示CMFAb组胚胎肝细胞增殖速度较其他两组更快。免疫荧光染色及Real-Time PCR结果显示，三组HP14.5在分别培养5天，CMFAb组ALB和CK18的蛋白及mRNA表达水平以及糖原合成水平显著高于CMFb组及DMEM组，而DMEM组胚胎肝细胞AFP的蛋白和mRNA表达水平明显高于CMFb组和CAFAb组胚胎肝细胞。显示CMFAb组HP14.5胚胎肝细胞分化成有功能的肝细胞能力强于CMFb组和DMEM组。结论：成纤维细胞Hepa1-6肿瘤细胞上清液在体外激活为肌成纤维细胞；激活后的肌成纤维细胞能刺激胚胎肝细胞增殖并转分化为以ALB及CK18为特殊标记物的成熟肝细胞，糖原染色显示，肝肝细胞分化后有相关成熟肝细胞的功能。该结果为提高移植肝细胞的长期生存和促进其分化为成熟肝细胞的能力提供了一定的理论基础。