铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)属兰科附生草本植物，是我国传统名贵中药，广泛运用于慢性咽炎、闭塞性周围血管病、白内障、青光眼等疾病的治疗药方及各种保健品中，市场需求量很大，长期无节制的采挖造成其资源枯竭，已无野生资源可用。近年来，铁皮石斛资源方面的研究在两个方面取得了进展：一是建立了铁皮石斛原球茎的人工增殖培养体系，开展了相关药理、药效研究，表明其可作为铁皮石斛的替代资源加以开发利用，并正在开展相关保健品的研发；二是建立了铁皮石斛种苗快繁体系，通过大规模人工栽培提供铁皮石斛资源。这些进展虽然在一定程度上缓解了铁皮石斛的资源紧张问题，但还有很多问题亟待解决。在铁皮石斛原球茎增殖培养方面，还存在增殖速度较慢、产量低等问题，还不能够满足保健品开发对原球茎资源的需求；在铁皮石斛人工种植方面，还存在铁皮石斛种苗商品名混杂、种质资源不规范，以及种苗数量供应不足、生长速度缓慢等问题，导致了铁皮石斛产量不高，质量参差不齐等问题。　　 本课题针对铁皮石斛资源存在的以上问题，在本实验室前期工作基础上，从以下几方面开展了相关研究：为解决人工栽培铁皮石斛种苗商品名混乱、种质资源不规范等问题，收集了流通于国内主要人工栽培基地的铁皮石斛多种商品名种苗及近缘植物种苗，通过相关基因扩增、测序、聚类分析等手段，开展了基因条形码在铁皮石斛种苗资源鉴定方面的初步研究，发现叶绿体rbcL基因可区分人工栽培铁皮石斛常见品种，为铁皮石斛种苗及铁皮石斛产品分类鉴定提供了一种重要手段；在已建立的原球茎大规模增殖培养技术的基础上，进一步开展了铁皮石斛原球茎的增殖条件优化研究，优化后的铁皮石斛原球茎增殖培养基配方为10％土豆汁+0.5%MS+0.3mg/L NAA，该配方可促使原球茎在三个月内增殖达11倍以上，铁皮石斛原球茎产量提高70%，可大大增加用于保健品开发的铁皮石斛原球茎的资源量；为增加人工栽培铁皮石斛苗的生长速度，通过将从铁皮石斛中分离到的内生真菌制备成真菌诱导子，开展了内生真菌对铁皮石斛苗的促生作用研究，并对其促生机理进行了探讨，从20株内生真菌中筛选出了NT43J06、NT12J04、NT04Y04、NT66G014株具有明显促铁皮石斛苗生长作用的内生真菌，并利用经典形态分类学和分子鉴定技术对其进行了分类鉴定，发现该4株内生真菌均属于子囊菌（亚）门，粪壳菌纲；经基因表达分析发现该4菌株均能明显增强生长素合成相关基因iaaM、PAL的表达，促进宿主植物的生长及增强宿主的抗逆性；经酶学分析发现NT43J06菌株可明显增加抗氧化酶POD、SOD活性，增强宿主的抗氧化能力；通过内生真菌侵染实验发现，与4株具促生作用内生真菌共培养2周的无菌苗中，均可分离出相应内生真菌，表明4株内生真菌均具有重新转染石斛苗的能力，正在将其开发成菌肥运用于铁皮石斛的大规模种植，以提高铁皮石斛产量，为铁皮石斛资源的可持续利用提供了新的技术手段。