肺癌转移相关蛋白的蛋白质组学分析及负性免疫分选法纯化转移灶中肿瘤细胞的探索

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通过对具有不同转移特性及处于肿瘤转移过程中多个不同环节的肿瘤细胞标本进行全景式的比较蛋白质组学研究,可以发现控制肿瘤转移的关键分子,为临床提供有效的治疗靶位的监测指标,从而揭示肿瘤转移的机制。为此我们采用了源于肺巨细胞癌株PLA-801 的两个具有不同转移特性的亚株PLA801C、PLA801D 作为研究对象。重新做了其体内、外转移表型的鉴定工作,证实两株细胞在转移方面及与转移有关的生物学行为上存在差异,确立这两株细胞用于肿瘤转移机制研究的地位,为以后的差异蛋白质功能验证提供了理论基础,并在本实验室首次建立了一套研究肿瘤转移特性的实验方法。我们创造性地探索了通过制备多克隆抗体,采用免疫磁珠负选方案纯化小的转移灶中肿瘤细胞的方法,证明此法分离的肿瘤细胞可使细胞纯度达87.86%。为下一步研究打下了基础。本文已建立了裸鼠皮下原发瘤及体外培养细胞株的细胞内蛋白及后者膜蛋白的2-DE图谱,并鉴定了与PLA801C的膜蛋白相比,在PLA801D 的膜蛋白中高表达的两个蛋白质PHB 和AnnexinA1。我们期望通过本研究的继续,发现与肿瘤转移发生及进展相关的异常蛋白的表达。通过本研究的扩展能够破解涉及肿瘤转移的关键分子事件,为肿瘤转移的诊断和治疗提供特异的靶位。
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