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阿美替尼是一种不可逆的第三代表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂（Epidermal growth factor receptor-tyrosine kinase inhibitor,EGFR-TKI）,它已被用于治疗表皮生长因子受体（Epidermal growth factor receptor,EGFR）突变型非小细胞肺癌（Non-small cell lung cancer,NSCLC）。中枢神经系统是EGFR突变阳性NSCLC常见的转移部位之一,由于肺癌脑转移患者预后较差且缺乏较好的治疗策略,因此成为目前临床上关注的重点。我们想要探究阿美替尼联合放疗治疗NSCLC脑转移（Brain metastases,BM）是否具有潜在的治疗效果。目的:本研究旨在探究阿美替尼联合放射治疗对EGFR突变型NSCLC BM的抗肿瘤作用;方法:首先,我们在BALB/c裸鼠中建立NSCLC脑移植瘤动物模型,并通过观察裸鼠颅内肿瘤病灶大小、体重变化以及生存期来评估阿美替尼联合放射治疗方式的抗肿瘤效果。此外,我们使用液相色谱-质谱（Liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MS）检测裸鼠脑组织和血浆中的阿美替尼药物浓度。然后,我们通过CCK-8、集落克隆、流式细胞术和免疫荧光染色检测阿美替尼联合放射治疗对PC-9和NCI-H1975细胞增殖、克隆形成能力、凋亡、周期分布、DNA损伤的作用,western blot检测凋亡相关蛋白Caspase3、Cleaved-caspase3、PARP、Cleaved-PARP,周期相关蛋白CDK1、p CDK1的表达水平。最后,我们收集临床病例,以探究EGFR突变NSCLC BM患者在接受上述联合治疗后的临床获益。结果:1.阿美替尼联合放射治疗对EGFR突变非小细胞肺癌脑移植瘤具有较好的作用在本研究中,阿美替尼和放射治疗能够抑制裸鼠颅内肿瘤的生长,二者联合使用后抗肿瘤效果更加明显。同时,我们通过立柱和粘签试验对裸鼠进行行为学测试,结果表明:相比于单独放疗组,阿美替尼联合放疗处理组裸鼠神经功能有明显改善,阿美替尼联合放射治疗增强裸鼠颅内抗肿瘤作用。2.阿美替尼联合放射治疗增加颅内阿美替尼的药物浓度我们在治疗后分别检测单独使用阿美替尼和阿美替尼联合放疗组脑移植瘤裸鼠的血浆和脑组织中的药物浓度,结果表明:与单独使用阿美替尼组相比,阿美替尼联合放疗处理组裸鼠颅内阿美替尼药物浓度更高。3.阿美替尼联合放射治疗协同抑制细胞增殖与存活我们检测了阿美替尼联合放疗对细胞增殖和存活的作用,结果表明:阿美替尼和放射治疗能够抑制细胞增殖和存活,联合治疗组作用更明显,通过计算CI值,证明了阿美替尼联合放疗具有协同作用。4.阿美替尼联合放射治疗增加细胞凋亡率通过流式细胞术探究阿美替尼联合放疗对PC-9和H1975细胞凋亡的影响,结果表明:相比于单独使用阿美替尼和放疗组,联合使用组增加了细胞凋亡比例。5.阿美替尼联合放射治疗改变细胞周期分布通过流式细胞术探究阿美替尼联合放疗对PC-9和H1975细胞周期分布的影响,结果表明:相比于对照组,阿美替尼联合放射治疗时,明显增加G1期细胞比例,同时降低S期细胞比例。6.阿美替尼延迟放疗所诱导的细胞DNA损伤的修复我们通过免疫荧光法检测γ-H2AX在8小时、24小时和48小时时间点的表达,从而探究阿美替尼联合放射治疗对细胞中DNA损伤的影响。辐照射线能够增加细胞中γ-H2AX的表达。阿美替尼单独使用时几乎没有γ-H2AX的表达,但当阿美替尼与放疗联合使用时可明显延迟辐照后的DNA损伤修复过程（图6A）。上述结果表明,阿美替尼单独使用没有诱导明显的DNA损伤,而阿美替尼和放射治疗的组合增加了放疗所诱导的DNA损伤程度,延缓放疗诱导的DNA损伤修复过程。7.阿美替尼联合放射治疗对EGFR突变非小细胞肺癌脑转移患者具有较好的作用一位EGFR突变NSCLC BM患者,接受脑部放射治疗51Gy/17F,同时每天口服阿美替尼110 mg,治疗三个月后,患者颅内肿瘤病灶部分缓解,患者无明显不良反应。结论:我们的研究表明阿美替尼联合放射治疗对EGFR突变NSCLC有较好的抗肿瘤作用,这种联合治疗方式可能成为临床上治疗EGFR突变NSCLC BM患者的一种潜在治疗策略。