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端粒酶是一种核糖核蛋白酶,它可合成端粒DNA,在正常体细胞中其活性受到抑制,但在肿瘤发生过程中,其活性被激活。本研究的目的是:(1)研究食管癌癌变过程端粒酶活性的情况;(2)了解癌组织中端粒酶活性与分化程度、浸润深度及与淋巴结转移的关系;(3)研究食管癌癌变过程hTERT、TP-1的mRNA表达情况及其与端粒酶活性的相关性;(4)研究食管癌癌变过程c-myc、bcl-X/L蛋白表达情况及其与端粒酶活性的相关性。 材料与方法:收集经病理确诊的手术切除新鲜食管癌标本45例,每例分别取癌灶、癌旁粘膜和远端切缘食管粘膜各一式二份。一份作连续冰冻切片,供检测端粒酶活性和hTERT、TP-1原位杂交用;另一份经10%福尔马林固定,石蜡包埋,连续切片,供c-myc、bcl-X/L免疫组织化学检测用。本文采用显微切割TRAP-银染法检测端粒酶活性;原位杂交法检测hTERT、TP-1的mRNA表达;免疫组织化学法检测c-myc、bcl-X/L的蛋白表达。 结果:45例全部为鳞癌,其中28例伴有区域淋巴结转移。1.显微切割TRAP-银染法检测端粒酶活性的结果: 端粒酶活性在癌旁非典型增生粘膜上皮及原位癌、浸润性癌中检出率明显高于正常上皮及单纯增生上皮,阳性率分别为79.3%、80.0%和82.2%。正常上皮及单纯增生上皮的阳性率分别为5.0%及9.0%。癌前病变组与非癌变组(包括正常上应及单纯增生上皮)比较差异有极显著性(P<0.01),而癌前病变组、原位癌、浸润性癌之间比较差异无显著性(P>0.05)。 端粒酶活性在同一癌组织不同浸润深度、不同分化程度的癌巢中差异无显著性(P>0.05)。 端粒酶活性在分化程度为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级的不同癌组织中的阳性率分别为66.7%(8/12)、84.6%(22/26)及100.0%(7/7),其差异无显著性(P>0.05)。 端粒酶活性在有淋巴结转移者中阳性率(92.9%)高于无淋巴结转移者(64.7%),两者差异有显著性(P<0.05)。 2.原位杂交检测 i。TERTmRNA的结果: hTERTmRNA阳性物定位于胞浆内,呈棕黄色细颗粒状,正常粘膜上皮中无 表达,少数单纯增生上皮中开始出现表达,癌旁非典型增生上皮及原位癌、浸 润性癌中表达较高,阳性率分别为55二%、60%及64.4%。癌前病变组与非癌前 病变组阳性率比较有极显著差异p<0对门。癌前病变组与原位癌、浸润性癌比 较则差异无显著性o功.0引。 h TETE RTmRTm RNRNA在癌组织中表达与端粒酶活性有相关性(P<0对引。 3.原位杂交检测 TP-lmKNA的结果 TP mRNA阳性物定位于跑浆内,呈棕黄色细颗粒状,少部分正常粘膜上 皮及单纯增生上皮中有表达,癌旁非典型增生上皮及原位癌、浸润性癌中表达 较高,阳性率分别为 58,6O、50%及 62.2o。癌前病变组与非癌前病变组阳性率 比较有极显著差异(P<0刀1)。癌前病变组与原位癌、浸润性癌比较则差异无显 著性(P>O.05)。 *F1> RNRNA在癌组织中表达与端粒酶活性无相关性(P>0刀5)。 4.免疫组织化学检测c-myc蛋白的结果 c-myc蛋白阳性物位于胞浆和/或胞核内,呈棕黄色细颗粒状,少部分正常粘 膜上皮及单纯增生上皮中有表达,癌旁非典型增生上皮及原位癌、浸润性癌中 表达较高,阳性率分别为 62.l%、90%及 82.2%。癌前病变组与非癌前病变组阳 性率比较有极显著差异(P<0刀1)。癌前病变组与原位癌、浸润性癌比较则差异 无显著性(P>0.oj)。 c-myc蛋白在癌组织中表达与端粒酶活性有相关性(P、0刀5人与hTERTmRNA 表达有极显著相关o<0对门。 5.免疫组织化学检测bCI-X/L蛋白的结果 bCI-Xh蛋白阳性物在胞浆内呈棕黄色细颗粒状,少部分正常粘膜上皮及单 纯增生上皮中有表达,癌旁非典型增生上皮及原位癌、浸润癌中表达较高,阳 性率分别为62.l%、80%及对,l%。癌前病变组与非癌前病变组阳性率比较有极 显著差异 呼<0刀1)。癌前病变组与原位癌、浸润癌比较则差异无显著性 o>O仍)。非典型增生中,克 中、重各组的阳性率为36.*%、肥*%及100%, 呈逐渐升高,差异有显著性叩<O‘0引。 } bCIX/L 蛋白在癌组织中表达与端粒酶活性有极相关性(P<0.01)。与h**RTn N A表达也有极显著相关性(P<0刀1)。 结论 1.食管癌癌前病变、癌组织