【摘 要】
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目的:通过网络理学和分子对接分析乌梅配方颗粒作用于失眠的相关靶点通路,并通过观察厥阴证失眠患者服用乌梅配方颗粒前后的睡眠状况、焦虑、抑郁情绪、中医证候的变化,评价乌梅配方颗粒对厥阴证失眠患者的临床疗效及用药安全性,并观察治疗前后血清中γ-氨基丁酸(GABA)、谷氨酸(Glu)、谷氨酰胺合成酶(GS)、谷氨酸脱羧酶(GAD)水平的变化,探究乌梅配方颗粒对Glu/GABA-谷氨酰胺(Gln)代谢环路的
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目的:通过网络理学和分子对接分析乌梅配方颗粒作用于失眠的相关靶点通路,并通过观察厥阴证失眠患者服用乌梅配方颗粒前后的睡眠状况、焦虑、抑郁情绪、中医证候的变化,评价乌梅配方颗粒对厥阴证失眠患者的临床疗效及用药安全性,并观察治疗前后血清中γ-氨基丁酸(GABA)、谷氨酸(Glu)、谷氨酰胺合成酶(GS)、谷氨酸脱羧酶(GAD)水平的变化,探究乌梅配方颗粒对Glu/GABA-谷氨酰胺(Gln)代谢环路的影响,进一步分析其作用机制。方法:1.基于网络药理学和分子对接技术探讨乌梅配方颗粒治疗失眠作用机制在TCMSP数据库中检索乌梅丸所具有的活性成分和作用靶点。在Gene Cards、OMIM数据库中筛选失眠相关的靶点。建立“药物-成分-靶点-疾病”网络图采用了软件Cyoscape3.7.1,以此分析KEGG信号通路富集、GO功能富集;同时开展分析对接实验,旨在对其作用机制进行预测。2.乌梅配方颗粒治疗厥阴证失眠的临床观察选择2021年8月至2021年12月XXXXXXX医院收治的30例厥阴证失眠患者,服用乌梅配方颗粒早晚各1次,疗程为4周。采用前后自身对照的方法,对比治疗前后,患者的汉密尔顿焦虑量表(HAMD)、匹兹堡睡眠质量指数量表(PSQI)以及汉密尔顿焦虑量表(HAMD)、汉密尔顿抑郁量表(HAMA)、中医证候积分量表评分变化,观察治疗效果,并检测患者服药前后血清中GABA、Glu、GS、GAD的含量。于治疗前后对患者进行血常规、尿常规、心电图、肝肾功检查以评价乌梅配方颗粒的安全性。对入组的30例患者其中13例于治疗前后进行磁共振检查。探究乌梅配方颗粒对厥阴证失眠患者的安全性及其对睡眠状况及焦虑、抑郁情绪和中医证候的影响,并探索其相关机制。结果:1.基于网络药理学和分子对接技术探讨乌梅配方颗粒治疗失眠作用机制筛选到乌梅配方颗粒中化学成分共75个,对应790个作用靶点,其中48个靶点与失眠有交集。乌梅配方颗粒的活性成分以槲皮素,β-谷甾醇,山萘酚,豆甾醇,黄连素等为主,可作用于PTGS1、GABRA1、AR、CASP3、PPARG等靶点,GO富集得到75个条目,KEGG富集到HIF-1、PI3K-Akt信号通路、雌激素、神经活性配体-受体相互作用等信号通路。结果显示,槲皮素与IL-6的最佳结合能为-2.38kcal/mol;汉黄芩素与IL-6的最佳结合能为-3.36kcal/mol,相比对照组要低,能够自主结合,同时构建较为稳定的结构。2.乌梅配方颗粒治疗厥阴证失眠的临床观察本研究共入组病例30例其中男性7人,女性23人。平均年龄50±10.64岁。患者依从性较好,无脱落病例,通过对服药前后的数据分析可见:1.厥阴证失眠患者服用乌梅配方颗粒治疗4周后PSQI、HAMD、HAMA量表评分显著降低,其差异存在统计学意义(P<0.05)。2.治疗后患者入睡困难、睡后易醒、心烦口苦、紧张易恐、神倦乏力等中医证候评分显著下降,总积分也存在下降,且差异显著,存在统计学意义(P<0.05)。3.治疗后患者血清中GABA、GAD含量较用药前明显升高,Glu、GS含量较用药前明显降低。差异有统计学意义(P<0.05)。4.共13名患者于服用乌梅配方颗粒前后进行了磁共振检查,其中失访4例。9名患者服用乌梅配方颗粒治疗前后的双侧内囊前肢、胼胝体膝部FA值差异无统计学意义;双侧内囊后肢的FA值较治疗前升高,差异有统计学意义(P<0.05)。5.患者服用乌梅配方颗粒治疗前后血常规、尿常规、心电图、肝肾功均未见明显异常。结论:1.乌梅配方颗粒中主要活性成分槲皮素,β-谷甾醇,山萘酚,豆甾醇,黄连素等可能通过作用于PTGS1、GABRA1、AR、CASP3、PPARG等多种关键靶点调控多条关键信号通路,发挥治疗失眠的作用。2.乌梅配方颗粒能够改善厥阴证失眠患者的睡眠状况,减轻其焦虑、抑郁情绪,并能够改善厥阴证失眠患者心烦口苦、紧张易恐、手足不温、腰膝酸冷、乏力耳鸣等中医证候,临床疗效显著。3.乌梅配方颗粒可以显著提高患者血清中的GABA、GAD,同时降低血清中Glu、GS的水平。初步分析乌梅配方颗粒可能通过调节Glu/GABA-Gln代谢环路改善厥阴证失眠患者的睡眠情况。4.乌梅配方颗粒可能通过调节脑白质的微观结构改善失眠。5.患者服用乌梅配方颗粒治疗期间未见明显不良反应,用药安全,值得推广。
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