BdTRN1功能的初步分析

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细胞核与细胞质之间的物质交流是细胞生命活动的基础,对物质的核质转运过程及其调控机制的研究具有重要的科学意义。TRN1(transportin 1)是蛋白入核转运载体,它的含量多少及功能能否正常发挥直接影响其底物的入核,进而影响到生物体的整个生长和发育过程。短柄草(Brachypodium distachyon)中关于TRN1的研究尚未见报导。本文首次克隆了短柄草中的BdTRN1基因,并通过胚性愈伤转化这一遗传转化方法在短柄草中成功过表达BdTRN1;其次鉴定了 BdTRN1的T-DNA插入突变体,初步确定了 T-DNA的插入位置,并对突变体的表型进行了初步的分析,结果显示,短柄草TRN1突变体的表型与拟南芥TRN1突变体sic1的表型类似;第三,生物信息学分析显示TRN1蛋白较为保守,AtTRN1与BdTRN1之间进化距离较远;第四,将BdTRN1转入拟南芥sic1突变体中,能够恢复sic1突变体的表型,说明TRN1的功能是保守的;第五,亚细胞定位结果显示,BdTRN1在细胞核与细胞质中都存在,并且细胞核内积累较多,BdTRN1的这种分布与AtTRN1的定位相似;第六,应用酵母双杂技术对TRN1蛋白的两种底物RNA结合蛋白BdRNP1及甘氨酸富集蛋白BdGRP7进行了互作验证,结果显示:BdRNP1与AtTRN1有互作而BdGRP7与AtTRN1无互作。本文初步证实了短柄草中TRN1蛋白的功能与拟南芥TRN1类似,但在底物结合的特异性上有所不同。本论文为进一步研究短柄草中TRN1的功能奠定了基础。
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