胰腺癌是预后最差的肿瘤之一,平均5年生存率低于5%.最近Wang等人应用PCR扩增和直接测序分析了20例中国台湾地区中国人的石蜡包埋胰腺癌组织的K-ras基因突变类型.结果显示20例中的18例有第12密码子的突变.在18个突变中除了一例为GGT-TTT突变外其它均为GGT-GTT突变.似乎K-ras基因的GGT-GTT突变在台湾地区的胰腺癌发生中有重要作用.尽管国际上关于胰腺癌的K-ras基因突变率及其突变模式的报道比较多,但是很少有关中国大陆胰腺癌K-ras基因突变模式的报道.在本项研究中,检测了30例外科切除、福尔马林固定、石蜡包埋的胰腺癌组织的K-ras基因第12,13密码子的突变情况.胰腺癌中,肿瘤细胞经常被大量的非肿瘤的反应性纤维组织包绕.由于这些特性,我们很难得到足够量的纯肿瘤细胞以供分子生物学分析.为了获得较纯的肿瘤细胞,用1ml的一次性注射器在倒置显微镜下手工切割肿瘤组织.另外,我们还分析了六株本实验室自建的中国人胰腺癌细胞系K-ras基因的突变情况.显微切割,PCR和直接测序技术的结合可以很敏感地检测K-ras基因突变.30例胰腺癌中有25例(83%)发现K-ras基因的突变,25例K-ras基因的突变中除了一例是第13密码子(GGC-TGC)突变外,其余的均为第12密码子突变(11例为GGT-GTT,7例为GGT-GAT,4例为GGT-CGT,2例为GGT-TGT).所有的结果都经反向测序证实.大多数的K-ras第12 密码子突变位于第二个碱基(72%,18/25),转换与颠换比例为1:1.57(7/11).在我们的胰腺癌病例中K-ras基因第12密码子的突变类型明显与欧洲人和日本人胰腺癌病例的不同.似乎K-ras基因第12密码子的GGT-GTT突变对大陆和台湾地区胰腺癌病例的发生起重要作用.