枸杞糖肽及其多酚复配物的生物活性研究

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枸杞糖肽是由枸杞多糖精制所得的多糖与肽的复合物。本课题研究了枸杞糖肽的免疫调节活性,将枸杞糖肽与葡萄籽多酚混合,探讨复配物对免疫调节活性的影响,展开了如下实验:(1)本文首先测定了枸杞糖肽中多糖、蛋白及糖醛酸含量。结果显示多糖、蛋白质、糖醛酸含量分别为55.45%、28.58%和5.72%。红外光谱分析结果表明枸杞糖肽多糖侧链可能有ββ-(1→6)-或β-(1→3)-连接的阿拉伯半乳聚糖。气、液相色谱分析结果表明枸杞糖肽中性多糖部分为鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖,单糖摩尔比为1.087:1.400:0.864:1.000:0.077;酸性多糖部分为半乳糖醛酸。(2)因抗氧化活性与免疫调节作用息息相关,本研究首先通过自由基清除能力实验测定了枸杞糖肽体外抗氧化活性。结果显示枸杞糖肽对DPPH和ABTS活性氮自由基有较强清除能力。(3)接着本研究评估了小鼠巨噬细胞及脾细胞功能来反映枸杞糖肽体外免疫调节活性。研究证明450至600μg/mL的枸杞糖肽能剂量依赖提高巨噬细胞吞噬作用,并通过调节脾细胞TNF-α产生促进脾淋巴细胞增殖,1200 μg/mL为枸杞糖肽刺激脾细胞增殖最适浓度。(4)除体外免疫调节作用,本课题还通过小鼠免疫低下模型探究了枸杞糖肽体内免疫调节作用。实验证明枸杞糖肽对免疫抑制小鼠器官指数、白细胞数量、单核-巨噬细胞吞噬活性、NK细胞杀伤活性以及脾T、B淋巴细胞增殖活性都有正向调节效应。由于枸杞糖肽含有大量阿拉伯糖,较T细胞其增殖B细胞的能力更强。(5)最后本研究将枸杞糖肽与葡萄籽多酚混合,探讨其较单成分而言对免疫调节活性的影响。通过自由基清除实验发现复配物对DPPH自由基清除具有协同效果。通过体外脾细胞和巨噬细胞培养,发现复配物对脾细胞增殖活性有协同作用,这与脾细胞内钙离子含量瞬时升高有关。在体内免疫调节方面,复配物对免疫抑制小鼠的外周血白细胞数量、脾脏指数、脾脏B细胞增殖活性恢复有协同效果。以上协同作用产生是由于葡萄籽多酚的加入使枸杞糖肽糖链空间构象更复杂引起。
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