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目的:探讨VEGF和Ang1双基因联合BMSCs干预对PVL模型小鼠NVU的保护作用。方法:本研究分两部分。第一部分:缺血缺氧诱导新生鼠PVL模型的建立及脑组织VEGF和Ang1水平变化选取7日龄昆明小鼠50只,随机分为模型组和假手术组,模型组30只,假手术组20只,模型组通过结扎单侧颈总动脉并在低氧环境下(6%O2+94%N2)饲养6小时的方法构建PVL新生小鼠模型,假手术组行同侧颈总动脉分离术后缝合手术切口,于造模后24小时、48小时、72小时和7天分别处死两组小鼠取脑组织,4%多聚甲醛固定后行HE染色、免疫组化染色等鉴定模型是否成功,同时通过RT-PCR检测脑组织VEGF和Ang1的水平变化,了解其与脑组织病理改变之间的关系。第二部分:携带VEGF和Ang1基因的BMSCs对缺血缺氧诱导PVL小鼠模型的干预研究将100只造模成功后的PVL新生小鼠随机分为BMSCs-VEGF、BMSCsAng1、BMSCs-A+V、BMSCs、模型盐水对照5组,每组20只,另外选取同日龄新生小鼠20只进行颈总动脉分离后设为空气对照组。每组小鼠于造模后24小时内在立体定位仪下侧脑室内注入相应干预因子,分别于干预后24小时、48小时、72小时和7天处死两组小鼠取脑组织,4%多聚甲醛固定后行HE染色、免疫组化染色等观察脑组织病理改变、VEGF和Ang1表达情况,同时做MBP免疫组化了解髓鞘化水平,同时通过RT-PCR检测脑组织VEGF和Ang1 m RNA的水平变化。结果:第一部分:应用单侧颈总动脉结扎结合低氧诱导的方法制作新生小鼠PVL模型,模型组动物体重增长缓慢,毛发粗糙凌乱无光泽,脑组织大体标本见软化灶形成,逐渐液化坏死形成囊腔,HE染色提示模型组神经细胞大小不等,核固缩、碎裂,证实PVL模型动物存在脑组织病理学的改变。RT-PCR显示术后模型组小鼠手术复苏后脑组织VEGF和Ang1表达逐渐增加,48小时后VEGF和Ang1 mRNA水平均高于假手术组。免疫组化提示两组小鼠VEGF和Ang1表达均随时间增加,但模型组平均光密度值明显高于假手术组(P<0.05)。第二部分:1、BMSCs-V+A组及BMSCs-Ang1组小鼠在麻醉复苏后体重增长较理想,病理学检查证实模型鼠脑损伤较其他组减轻明显,BMSCs和BMSCsVEGF组体重增长较慢,与模型组相比无统计学差异(P>0.05),脑组织病理学改善不明显,与模型对照组比较无统计学差异。2、免疫组化:BMSCs-V+A组和BMSCs-VEGF组VEGF平均光密度值增加,但BMSCs-VEGF组MBP平均光密度值与模型对照组无差异(P>0.05)。BMSCs-V+A组、BMSCs-Ang1组及BMSCs组Ang1和MBP平均光密度值均增加,与模型对照组相比有显著差异(P<0.05),BMSCs-V+A组MBP表达与空气组接近,无统计学差异(P>0.05)。3、RT-PCR:BMSCs-VEGF组和BMSCs-V+A组VEGF mRNA水平迅速升高,与模型对照组差异显著(P<0.05),BMSCs-V+A组和BMSCs-Ang1组Ang1mRNA水平显著升高,与模型对照组差异显著(P<0.05)。结论:1、采用缺血缺氧诱导的方法可以建造理想的新生小鼠PVL模型,模型组小鼠脑组织VEGF和Ang1水平在损伤早期均升高。2、联合应用携带VEGF和Ang1基因的BMSCs可以有效的修复受损的NVU,保护神经细胞,促进神经纤维髓鞘化,减轻PVL脑损伤,从而为PVL的有效干预提供了新的思路。