活体小鼠心脏去甲肾上腺素分泌的实时原位检测方法的建立

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心脏的各项生理活动主要受到交感神经系统的调控。交感神经末梢主要通过分泌NE作用于心肌细胞上的去甲肾上腺素受体来调节心脏的收缩和舒张等功能。一些常见的心脏病的发生,如心衰,心律不齐,高血压等都伴随着NE分泌的异常。因此检测心脏NE分泌的变化对于心脏病的预防和治疗都具有重要的意义。但是现有的手段比如放射性同位素稀释法,电生理法,电化学法以及检测心脏组织匀浆中NE总量的方法时空分辨率都不高,而且不能进行在体实验,无法准确反应活体心脏中NE分泌的变化。本课题使用安培法的实验原理,在心脏薄片电化学(cardiac Slice ElectroChemistry,cSEC)的基础上,采用更适合活体的跳动的心脏的金纤维电极,建立了一种实时原位地检测活体小鼠心脏NE分泌变化的方法,称为心脏生理电化学技术(cardiac Physiological ElectroChemistry,cPEC)。
  我们使用cPEC方法成功地记录到了活体小鼠心脏的氧化电流信号,并且经过以下几个实验方法验证,记录到cPEC信号是心脏交感神经末梢分泌去甲肾上腺素的氧化信号:(1)cPEC信号具有电压依赖性;(2)突触前α2-AR激动剂NE和可乐定能够使cPEC信号显著降低;(3)单胺类物质转运体VMAT的阻断剂利血平能够使cPEC信号显著降低;(4)微透析-高效液相色谱实验证明cPEC信号主要来自心脏交感神经末梢释放的去甲肾上腺素。以上结果充分证明了cPEC信号主要来自心脏交感神经末梢释放的去甲肾上腺素。
  cPEC技术的建立,是世界上首例能够实时原位的在体检测心脏交感神经末梢去甲肾上腺素分泌的技术,对心衰等心脏疾病的预防和治疗提供了新的手段。
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