水椰八角铁甲卵巢发育过程中卵黄原蛋白的表达谱测定及其功能验证和潜在的调控机理

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水椰八角铁甲Octodonta nipne(Maulik)是一种严重危害棕榈科植物的入侵害虫,强大的生殖能力是其成功入侵和种群快速扩增的关键。卵黄原蛋白(Vitellogenin,Vg)作为卵黄蛋白的重要前体,在脂肪体中合成,经血淋巴转运至卵巢中沉积,成为胚胎发育的主要营养来源,在昆虫生殖过程中发挥着重要作用。但水椰八角铁甲卵黄原蛋白合成机制尚不明确,而深入探讨该害虫卵黄原蛋白合成的分子调控机制对该害虫的有效控制有着深远的意义。因此,本研究探讨了水椰八角铁甲卵巢发育过程中Vg的动态表达以及Vg对卵巢发育的影响,并研究了保幼激素(juvenile hormone,JH)对卵黄原蛋白合成的调控。主要研究结果如下:(1)选取未经交配的0、5、10、15和20 d的水椰八角铁甲雌成虫进行卵巢解剖并测量卵巢的相关参数,发现水椰八角铁甲卵巢在羽化后逐渐发育膨大,卵黄蛋白逐渐积累;RT-qPCR和ELISA表明随着卵巢的发育,整虫中的Vg表达量逐渐增加,Vg不断在卵巢中富集;而当RNAi降低Vg的表达量时,引起了卵巢管宽度和卵巢横截面积的降低,表明Vg可以影响卵巢的形态发育。(2)JH在调控Vg表达过程中发挥重要作用,本研究发现调控水椰八角铁甲JH合成的保幼激素酸甲基转移酶(juvenile hormone acid methyl transferase,JHAMT)的基因表达与Vg表达呈正相关,当JHAMT基因被沉默后显著降低了 Vg的含量,表明JHAMT通过控制JH的合成调控了 Vg的表达;有趣的是,JH的重要受体Methoprene-tolerant(Met)的基因相对表达量维持稳定,且Met含量的降低并没有对Vg的相对表达量造成影响,但Met含量的降低却显著性地影响了参与变态的Kruppel-homolog 1(kr-h1)的相对表达量,猜测Met不参与或不能独立参与对vg转录的调控。综上所述,Vg是水椰八角铁甲卵黄发生中重要的贮存蛋白,在促进卵巢形态发育过程中发挥重要作用,JHAMT参与JH的合成,调控了Vg的表达,然而在这个调控过程中JH受体Met对Vg表达的调控还有待进一步的研究。
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