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目的:研究自噬与凋亡相关通路及核对线粒体调控在大鼠耳蜗老化过程中的可能作用机制,并初步探讨老年性耳聋可能的发病机制,为老年性耳聋的治疗和预防提供新的思路和方法。 方法:选取耳廓反应灵敏的7周龄SD大鼠128只,适应性喂养一周后随机分为四组:D-半乳糖+雷帕霉素组(n=16),D-半乳糖+DMSO组(n=16),D-半乳糖+生理盐水组(n=48),生理盐水对照组(n=48)。D-半乳糖+雷帕霉素组每日按照0.02mg/Kg的剂量腹腔注射雷帕霉素半小时后按照500mg/Kg的剂量颈部皮下注射D-半乳糖,D-半乳糖+DMSO组每日腹腔注射与雷帕霉素组等剂量的DMSO,半小时后按照500mg/Kg的剂量颈部皮下注射D-半乳糖,D-半乳糖+生理盐水组每日腹腔注射与雷帕霉素等体积的生理盐水半小时后按照500mg/Kg的剂量颈部皮下注射D-半乳糖,生理盐水组每日腹腔注射与雷帕霉素等体积的生理盐水半小时后腹腔注射与D-半乳糖等体积的生理盐水,连续注射8周。注射后将D-半乳糖+生理盐水组和生理盐水对照组分为给药后0,6,17个月三个亚组,每亚组16只。免疫组织化学法检测大鼠耳蜗中LC3蛋白的定位表达。实时定量PCR法检测大鼠耳蜗组织中LC3,Bcl-2,PGC-1a基因的mRNA表达。Western-blot检测大鼠耳蜗中LC3,Bcl-2,PGC-1a基因的蛋白表达。 结果:免疫组化示LC3蛋白广泛表达于大鼠内耳的外侧壁、基底膜、螺旋神经节,在细胞核和细胞质均有表达。给药后0个月,大鼠耳蜗LC3在D-半乳糖+雷帕霉素组较D-半乳糖+生理盐水组表达增加,LC3、Bcl-2、PGC-1a在D-半乳糖+生理盐水组较生理盐水组表达增加。给药后6个月LC3、Bcl-2、PGC-1a在D-半乳糖+生理盐水组较生理盐水组表达增加。给药后17个月LC3、Bcl-2、PGC-1a在D-半乳糖+生理盐水组较生理盐水组表达无明显统计学差异。给药后6个月与0个月相比LC3,Bcl-2, PGC-1a表达增加。给药后17个月较0个月LC3、PGC-1a表达无明显统计学差异,Bcl-2表达减少。 结论:内耳组织的老化过程中涉及核基因对线粒体的调控,自噬与凋亡可能也参与ARHL的病程。雷帕霉素可以增加大鼠内耳中自噬基因LC3的表达。