姜黄属中药及姜黄素活血化瘀抗动脉粥样硬化的文献整理及实验研究

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以动脉粥样硬化为病理基础的心脑血管疾病严重危害着人类的健康。因此,预防及有效地控制该病的进展,一直就是心脑血管领域研究的热点,也是世界医学界关注的热点问题。中医学认为,现代医学所指动脉粥样硬化与瘀血的关系密切,其治疗强调活血化瘀。查阅了大量重要中医方剂古籍、本草古籍并结合导师多年的临床实践,发现诸多活血化瘀方药涉及姜黄属常用中药姜黄、莪术、郁金。进一步查阅文献发现它们都含有的共同主要成分之一为姜黄素,因此,我们进一步研究了姜黄素在抗动脉粥样硬化方面的作用。本论文包括文献综述和实验研究两部分。文献综述部分总结了血瘀证与现代医学所指动脉粥样硬化疾病的相关论述,整理了部分中医方剂古籍、本草古籍中姜黄、郁金、莪术在血瘀证方面的临床应用概况,同时总结了近年来姜黄素的基本性质、主要药理作用及在抗动脉粥样硬化等方面国内外的研究概括与进展。实验研究由姜黄素抗动脉粥样硬化作用剂量的确定和姜黄素抗动脉粥样硬化的作用及其机制探讨两部分组成。文献综述部分查阅了始于唐代至近现代的28本中医药古籍,整理出姜黄属中药临床用于血瘀证的方剂共87首。临床用于血瘀证含有姜黄的方子有36首,其中有15首用于治疗心下急痹、胸胁痛、心腹痛等;含有莪术的方子有30首,其中有10首用于治疗厥心痛、心腹疼痛等;含有郁金的方子有21首,其中有16首用于治疗腹痛胸闷心腹疼痛等。从整理的结果来看,姜黄、莪术、郁金临床应用的病症有现代医学中的心血管病,妇女月经、产前、产后等各时期的血瘀证。黄素作用剂量确定研究,通过选取6周龄ApoE(-/-)小鼠20只,根据给药剂量的不同随机均分为空白对照、姜黄素大、中、小剂量4组,均饲以高脂食料,持续灌胃给药4周后取材。检测血浆TC.TG.HDL-C水平;冰冻切片HE染色法,观察右颈总动脉血管外膜炎性细胞的浸润情况;天狼猩红套染维多利亚蓝法,观察右颈总动脉血管胶原含量、弹力纤维分级及内中膜厚度的变化;免疫荧光法,测定右颈总动脉超氧化物歧化酶SOD2的表达。结果表明(1)各组血浆总胆固醇、甘油三酯水平均无显著差异(P>0.05),但大剂量组显著提高高密度脂蛋白水平(P<0.05);(2)各组血管外膜均有炎性细胞浸润,炎细胞种类无统计学差异(P>0.05),但大剂量组显著降低炎细胞数量(P<0.05);(3)各组Ⅰ型、Ⅲ型胶原含量、弹力纤维病变无显著差异(P>0.05);但大剂量组显著减小内中膜厚度(P<0.05);(4)大剂量组SOD2的荧光强度显著高于其他组(P<0.05)。因此,确定正式实验研究中使用大剂量姜黄素。姜黄素对ApoE(-/-)小鼠早期动脉粥样硬化的作用及其机制探讨部分,通过选取6周龄ApoE(-/-)小鼠40只,根据给药的不同随机均分为正常组、模型组、阿托伐他汀组、姜黄素组。持续4周灌胃给药后取材。检测血浆TC.TG.HDL-C的水平;石蜡切片HE染色法,观察右颈总动脉血管外膜炎性细胞的浸润情况;免疫组化法,测定右颈总动脉炎症调控因子NF-κB及ICAM-1、CD68的表达;Western blot去,测定主动脉抗炎症因子PPAR-γ、SOD2的表达。结果表明(1)各组血浆总胆固醇、甘油三酯水平均无显著差异(P>0.05),但与其他各组比较姜黄素组显著提高高密度脂蛋白水平(P<0.05);(2)各组血管外膜均有炎性细胞浸润,炎细胞种类无统计学差异(P>0.05),但与其他各组比较姜黄素组显著降低炎细胞数量(P<0.05);(3)NF.κB. ICAM-1.CD68的表达显示姜黄素组和阿托伐他汀组与对照组比较有显著降低(P<0.01),姜黄素组与阿托伐他汀组比较降低更明显(P<0.05);(4)与模型组相比,其他组PPAR-Y.SOD2蛋白的表达均显著提高(P<0.05)。实验结果表明,姜黄素具有抗ApoE(-/-)小鼠早期动脉粥样硬化的作用,并且可能是通过上调PPAR-γ、增加SOD2减少氧化应激,进而干预NF-κB通路实现的,初步明确了姜黄素抗早期动脉粥样硬化的药理机制。
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