Toll样受体在LPS诱导的胆管上皮—间叶样表型转化过程中的作用实验研究

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目的:检测胆管上皮细胞与脂多糖(LPS)共培养情况下,Toll样受体(TLR4,Toll-likereceptor4)、上皮标志物细胞角蛋白(CK7,Cytokeratin7)以及间叶标志物波形蛋白(Vimentin)的表达变化,从而探讨TLR4在LPS诱导胆管上皮细胞上皮-间叶样表型转化中的可能作用。方法:用最适浓度LPS(2μg/ml)诱导胆管上皮细胞24小时、48小时、72小时,用实时荧光定量PCR检测目的基因TLR4、CK7、以及Vimentin在mMRA水平的表达变化情况,用SPSS17.0统计软件进行统计分析。结果:LPS诱导胆管上皮细胞,不同时间点检测TLR4、CK7以及Vimentin,实验结果显示:TLR4在LPS刺激24小时后表达明显上升,48小时达高峰,72小时表达降低,但扔维持较高水平。72小时内上皮标志物CK7目的基因在mRNA上表达明显下降(P﹤0.05),且随诱导时间的增加而逐渐降低。间叶标志Vimentin目的基因在mRNA上表达明显上升(P﹤0.05),且随诱导时间的增加而逐渐增加。同时,TLR4表达量的增加伴随着CK7表达的下降和Vimentin表达的升高。结论:LPS刺激下,胆管上皮细胞可发生上皮-间质转变(Epithelial-mesenchymaltransitions,EMT),且TLR4在LPS诱导的胆管上皮细胞EMT过程中可能发挥了重要作用。
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