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急性中耳炎(acute otitis media,AOM)是儿童期发病仅次于上呼吸道感染的最常见的感染性疾病,其中最困扰临床的是复发性AOM和顽固性AOM,据统计,约20%-30%的儿童罹患复发性AOM,且这一数据还在逐年增加。频繁的中耳感染不仅会引起患儿鼓室硬化、粘连性中耳炎以及中耳胆脂瘤,从而导致患儿听力进行性下降,甚至会影响到语言的发育。然而,其确切发病机制、抗生素耐药机理以及反复发作的原因等至今仍不清楚。自2001年Post等首次在分泌性中耳炎的发病机制中提出细菌生物膜的致病理论以来,细菌生物膜与中耳炎的关系迅速成为学者们关注的焦点,但目前文献多侧重于研究细菌生物膜和分泌性中耳炎的关系。2009年,Reid等和Hoa等分别在不同的粟鼠AOM动物模型上观察到有细菌生物膜的存在,但细菌生物膜在AOM中的形成特点、是否参与AOM的发病过程以及临床意义等,仍有待深入研究。基于此,我们设计了本课题。研究分两个部分进行,在第一部分研究中,我们探讨了通过听泡穿刺、将肺炎链球菌注入到大鼠中耳腔建立大鼠AOM模型的可行性,并通过观察其病理变化和病程,探讨了该模型的应用价值,以期为后续的深入研究提供基础资料。研究证实,将50ul肺炎链球菌悬液(1×108CFU/ml)经听泡穿刺注入到大鼠中耳腔建立了急性中耳炎的大鼠模型,成功率100%,是研究人类中耳炎较为理想的动物模型,不仅可用于急性化脓性中耳炎的研究,也可用于急性分泌性中耳炎的研究。在成功建立了急性中耳炎大鼠模型的基础上,我们进行了第二部分的研究,采用扫描电镜并结合免疫荧光原位标记技术、激光扫描共聚焦显微镜来研究细菌生物膜在急性中耳炎大鼠中耳腔的形成及其临床意义,并探讨大鼠AOM动物模型用于细菌生物膜研究的可行性。研究发现,细菌生物膜在中耳急性感染的早期即已开始形成,并可能成为日后炎症反复发作或迁延不愈的原因,早期及时应用抗生物膜药物有助于感染的彻底根除,本研究建立的大鼠急性中耳炎模型是研究细菌生物膜较为理想的动物模型。