钛基生物材料表面抗凝血及促内皮细胞生长改性研究

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材料的血液相容性是心血管植入器械等血液接触材料的研究重点,而材料表面内皮化是实现材料长效抗凝血的根本方法,目前的表面改性方法大多只注重抗凝血或内皮化单方面的研究,无法从根本上解决抗凝血与内皮化的矛盾,因此,本文的主要目的是以广泛应用于血液接触材料的钛合金(Ti6Al4V)材料作为研究对象,采用现代表面改性技术将抗凝血分子以及促内皮细胞生长的生物分子同时接枝到材料表面,以期望获得同时具有抗凝血与促内皮化的新型材料表面。  采用等离子处理和碱热处理两种方式活化钛合金表面,结合表面自组装技术以及表面原位接枝改性技术将肝素、白蛋白、2-甲基丙烯酰氧乙基磷酸胆碱(MPC)接枝到材料表面。水接触角的研究结果表明,等离子处理和碱热处理后的材料表面亲水性大大提高,在接枝肝素、MPC后的材料表面亲水性得到进一步改善,而白蛋白改性后的材料表面亲水性降低。ATR-FTIR(衰减全反射-傅里叶变换红外光谱)的研究结果表明,两种活化处理方式都可以成功地在材料表面接枝肝素、白蛋白以及MPC,但等离子体处理的改性效果并不比碱热处理理想。静态血小板粘附实验以及APTT(部分凝血活酶时间)凝血实验结果表明,两种处理方式表面接枝肝素、白蛋白与MPC均可使材料表面的血小板粘附情况得到明显改善,并延长APTT凝血时间,但与肝素和MPC相比,白蛋白改性材料表面的血小板粘附情况并不理想。由于碱热处理使材料表面变得较为粗糙,导致抗凝血性能较等离子体处理样品变差。  为了提高材料在体内的长效抗凝血性能,克服单一抗凝血分子表面改性的缺陷,在等离子以及碱热活化处理后接枝抗凝血分子聚乙二醇二羧酸基础上,进一步表面原位接枝肝素、白蛋白和MPC,从而使表面具有两种抗凝血分子,提高材料的抗凝血性能。水接触角的研究结果表明,接枝聚乙二醇二羧酸后(Ti-PEG)材料表面的亲水性得到改善;在进一步接枝肝素、MPC后的材料表面亲水性得到进一步改善,而白蛋白改性后的材料表面亲水性降低。ATR-FTIR的结果表明,通过聚乙二醇二羧酸成功将肝素、白蛋白与MPC固定在材料表面,等离子体处理的改性效果依然不比碱热处理理想。静态血小板粘附实验的研究结果表明在固定聚乙二醇后的血小板粘附情况得到很好的改善,而进一步接枝生物活性分子后的材料表面血小板粘附情况进一步得到改善;同时,APTT凝血实验的结果也表明接枝两种抗凝血分子的抗凝血性能较单一接枝效果理想。  为获取同时具有抗凝血与促内皮生长表面,我们在接枝了聚乙二醇的钛合金表面固定细胞外基质蛋白——Ⅰ型胶原蛋白,并对其促内皮化性能进行了初步探索。ATR-FTIR结果表明Ⅰ型胶原成功固定在材料表面;水接触角的研究表明,在固定Ⅰ型胶原蛋白后的材料表面亲水性增强,这有利于内皮细胞的粘附。血小板粘附实验结果表明,材料表面的抗凝血性能与接枝聚乙二醇相比并未出现显著变化,表明材料表面接枝细胞外基质蛋白并没有明显影响材料的抗凝血性能。通过CCK-8的细胞增殖实验可以看出,肝素等分子都不同程度的促进了细胞的粘附与增殖,而I型胶原则具有很好的促进内皮细胞在材料表面粘附增殖的功能,显示出材料表面可能具有较好的促内皮生长性能。
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