原花青素聚合度测定及分级分离

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原花青素是自然界中广泛存在的一类天然多酚化合物的总称,由不同数量的儿茶素、表儿茶素单体及各自没食子酸酯聚合而成。原花青素含有众多酚羟基基团,表现出优良的抗氧化活性和清除自由基的能力,广泛应用于医药、保健、美容、营养等领域。聚合度不同,原花青素生物活性随之变化。对原花青素的研究主要以多种聚合度混合物的形式进行,缺乏单一聚合度样品的生物活性数据。找到一种方便、准确、稳定的方法测定原花青素聚合度,对原花青素分级分离、富集低聚体、充分发挥原花青素生物活性有重要意义。本文研究了粘度法测定原花青素聚合度,得到了原花青素比例常数K和扩张因子a.简化了 Mark-Houwink方程,[η]=9.582×10-5×M0.870,实验结果与香草醛法聚合度测定结果一致。利用大孔树脂吸附法对原花青素进行分级分离,采用10%~40%(间隔2%)、60%乙醇溶液梯度洗脱得到不同聚合度原花青素样品。10%乙醇洗脱液中为原花青素样品单体。12%~34%乙醇洗脱液对应原花青素以低聚体为主,其中乙醇浓度为22%~24%,对应原花青素样品为二聚体。乙醇洗脱液浓度继续增大至60%,对应样品为高聚体。.得到了原花青素的质量分布、抗氧化活性、水溶性、色泽等随聚合度变化的性能数据。对40%~60%乙醇溶液洗脱下来的原花青素高聚体水解,反应时间一定,水解程度随pH、温度变化,得到了较优水解工艺条件,与前期实验一致。
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