紫外辐照(UV-B)及超声波处理对雷公藤悬浮细胞中三种次生代谢物合成的影响

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雷公藤(Tripterygium wilfordii Hook.f.)系卫矛科雷公藤属植物,它既是著名的药用植物,又是一种重要的杀虫植物。西北农林科技大学无公害农药研究服务中心经研究已表明雷公藤根皮中的主要活性物质是雷公藤甲素和生物碱类,并发明一项专利-“一种由雷公藤细胞培养法生产雷公藤甲素和生物碱的方法”,但是目前这种方法生产的雷公藤次生代谢物含量较低。根据相关研究表明,低剂量的紫外光(UV-B)辐照以及超声波对植物生长量及次生代谢物释放和植物次生代谢物含量具有一定的促进效果,因此近年来特受人们重视。为此本研究进行了紫外光(UV-B)辐照和超声波处理对雷公藤悬浮细胞系中次生代谢物的影响,以期能够筛选出雷公藤悬浮细胞及次生代谢物含量较高的紫外辐照和超声波处理条件,达到高效地产生有效的次生代谢物质的目的,为后期工业化生产雷公藤次生代谢物提供数据基础。主要研究结果如下:1.在雷公藤悬浮细胞的不同培养时期,利用不同时长的紫外光(UV-B)辐照和超声波分别处理的雷公藤悬浮细胞,结果表明紫外光(UV-B)辐照和超声波处理均可以显著提高雷公藤悬浮培养体系中悬浮细胞生长量及其次生代谢物的含量。紫外辐照及超声波处理均可使雷公藤悬浮细胞的生长量比对照提高1~2倍。2.在雷公藤悬浮细胞的不同培养时期,利用不同时长的紫外光(UV-B)进行辐照,结果表明紫外辐照对雷公藤悬浮细胞中次生代谢产物的含量有明显的促进作用。在雷公藤悬浮细胞生长周期的第13天用UV-B辐照90min,雷公藤悬浮细胞内内酯醇、吉碱、次碱产物含量达到最大,分别为5.185,39.747和42.189ug/L。3.在雷公藤悬浮细胞的不同培养时期,利用不同时长的超声波进行处理,发现超声波对雷公藤悬浮细胞中次生代谢产物含量及次生代谢物释放分泌入细胞培养液中有一定程度的促进作用,通过对雷公藤悬浮细胞培养液中次生代谢物含量的检测发现,在处理时长为40s时,内酯醇、吉碱和次碱的转化率分别达到93.7%,86.6%和88.1%,与对照相比含量提高1~3倍。
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