目的面神经损伤后影响再生神经功能恢复的因素极为复杂。神经修复的目的不仅是神经干的再生,更重要的是神经生理功能的重建。本实验建立面神经横断伤动物模型,通过观察面神经轴突横断后损伤局部的形态学改变、电生理反应、以及局部营养因子的表达和分布,探讨面神经损伤后局部微环境对轴突及其侧支生长和功能恢复的影响。方法随机选取成年健康的新西兰白兔36只,设立单纯离断组、显微吻合组、神经生长因子(NGF)治疗组三个实验组。单纯离断组:分离暴露面神经颊支,将其横断,并将断端套入?2.4mm硅胶管内,建立硅胶再生室,每隔3日于硅胶管内注入无菌生理盐水0.1ml;显微吻合组:分离暴露面神经颊支,将其横断后在手术显微镜下以10/0显微缝合线缝合断端,每隔3日于吻合口处注入无菌生理盐水0.1ml;NGF治疗组:分离暴露并横断面神经颊支,在手术显微镜下以10/0显微缝合线缝合断端,每隔3日于吻合口处注入含2μgNGF无菌生理盐水0.1ml。每组分为2周、4周、6周三个时相点,各组取4只(8耳)在各时相点做电生理检查,观察其动作电位潜伏期与传导速度变化,取标本做免疫组化,观测神经生长因子在局部的分布和表达,在4周和6周时对标本进行镀银染色及HE染色在光镜下观察,并通过透射电镜观察,了解局部轴突与侧枝生成的形态学变化。结果1.大体观察:术后2周:3组动物面神经损伤处(再生室)周围均可见结缔组织包裹。术后4周:单纯离断组、显微吻合组神经干损伤处远端较正常神经干细,NGF治疗组较另外两组略粗。术后6周:单纯离断组神经干损伤处远、近端较正常神经干略细,显微吻合组神经干吻合处略膨大增粗,NGF治疗组神经干吻合处增粗膨大,较正常神经干粗。各组之间神经干损伤处远端直径有显著性差异(P <0.05)。2.神经电生理检测:术后2周时,无论单纯离断、吻合或NGF治疗组均未引出明显动作电位。术后4周时,各组均引出动作电位,且潜伏期较正常对照明显延长,但各组之间没有明显区别。神经传导速度各组之间差别亦不明显,且各组速度均较正常慢。术后6周时,各组潜伏期虽较正常延长,但与4周时相比显著缩短,单纯离断组神经传导速度较正常慢,而显微吻合组和NGF治疗组神经传导速度较之增快,NGF治疗组增快相对更为显著。3.免疫组化检测:NGF在不同时相点各组中均有广泛的表达,主要分布于间质之中,在神经束膜上密集,表达呈强阳性。而单纯离断和显微吻合组均在4周及6周时表达较为显著。4.嗜银染色及HE染色:术后4周单纯离断组再生纤维比例少,排列松散,走行方向杂乱。显微吻合组再生纤维比例较单纯离断组多,但排列松散,走行方向仍显杂乱。NGF治疗组再生纤维多,排列相对紧密,走行方向较为整齐。术后6周:各组再生纤维比例均较4周时增加,排列与走行方向趋于紧密和整齐。NGF治疗组再生纤维比例多,密度大,排列紧密,走行方向整齐。5.电镜观察:术后4周:单纯离断组再生纤维少见,再生组织主要为胶原纤维。显微吻合组再生纤维相对较多,髓鞘厚度薄且不一致,板层结构松散,有髓纤维直径小(≈5μm),有髓与无髓纤维比例约1:2。NGF治疗组再生纤维相对较多,有髓纤维直径较粗(≈6μm),排列相对均匀致密,板层结构致密,但无髓纤维比例也较多,有髓与无髓纤维比例约1:3。术后6周:各组再生纤维髓鞘增厚,直径增大,但结构尚不够致密。单纯离断组少量有髓纤维散在分布于胶原组织中,板层结构稀疏,有髓与无髓纤维比例约1:2。显微吻合组再生纤维比例增多,髓鞘结构与4周时比相对整齐、致密,有髓与无髓纤维比例约1:2。NGF治疗组再生纤维多,排列紧密。髓鞘厚度均匀,板层结构致密,有髓与无髓纤维比例约1:3。结论1.面神经损伤后局部的机械引导和微环境中的神经因子可促进轴突及侧支的生长。2.面神经损伤后再生纤维中有髓纤维比例的大小可能影响到神经生理功能的恢复程度。3.通过精确的对位吻合与提高局部神经营养因子的浓度可以缩短神经修复过程,提高恢复水平。