昆明裂腹鱼幼鱼生长发育及五种农药的急性毒性

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本研究以昆明裂腹鱼幼鱼为试验材料,综合发育生物学、酶学和分子生物学等研究方法,一方面,探究了昆明裂腹鱼幼鱼的生长规律、消化酶活性及PepT1mRNA的表达;另一方面,探讨了农药对昆明裂腹鱼幼鱼的急性毒性作用,并在此基础上,研究了乐果造成的慢性毒性作用及Vc对其作用的影响,主要结果如下:1、为了认识昆明裂腹鱼幼鱼的生长特征。对昆明裂腹鱼仔、稚、幼鱼的体长及体重进行测定,作出总体发育趋势,并重点探究168~210日龄昆明裂腹鱼幼鱼的生长特征,采用5种生长模型模拟体长-体重的生长过程,比较分析得出最适的生长方程,并通过肥满度及生长指标探究其生长特性。结果表明,昆明裂腹鱼幼鱼体长-体重呈幂函数关系:W=0.013L3.234(R2=0.970),体长的生长速度方程为:vL=1.3092-0.1104 t+0.0024 t2,体重的生长速度方程为:vW=8.8033-0.6592 t+0.0126 t2。表明昆明裂腹鱼幼鱼呈异速生长,且体重的生长速度快较体长快。2、研究了昆明裂腹鱼幼鱼消化酶的活性特征。结果显示:(1)LPS在不同组织中的活性大小为:肝脏﹥肠道﹥肌肉,且182日龄前肠道和肝脏中活性较低,182日龄后活性显著升高,182日龄时肝脏中LPS活性为肠道的5.7倍,为肌肉的6.31倍;(2)AMS活性在不同组织中大小为:肠道﹥肝脏﹥肌肉,其在肠道和肌肉中均呈上升式梯形变化,而肝脏持续增长到210日龄后下降;(3)胃蛋白酶活性大小为:肠道﹥肌肉﹥肝脏,其在肠道和肝脏中呈现出下降式梯形变化,而肌肉中则呈波浪状上下起浮,且在210日龄活性达最大,但仍低于肠道,而高于肝脏。结果表明:(1)昆明裂腹鱼幼鱼LPS活性在生长过程中会发生阶段性变化;(2)昆明裂腹鱼幼鱼中AMS和胃蛋白酶为间歇性分泌。3、研究了昆明裂腹鱼幼鱼PepT1 mRNA的表达情况。结果显示:168日龄到175日龄PepT1 mRNA表达上升,175日龄到203日龄,表达逐渐降低,210日龄的PepT1 mRNA表达量相对203日龄显著上升(P<0.05)。结果表明:PepT1mRNA的表达受营养物质需求及蛋白质含量调控。4、研究了草甘膦铵盐、草甘膦、乐果、甲氰菊酯、阿维菌素对昆明裂腹鱼幼鱼的急性毒性效应并进行安全评价,结果显示:草甘膦铵盐、草甘膦、乐果、甲氰菊酯、阿维菌素对昆明裂腹鱼幼鱼的LC50分别为5.755 mg/L、210.7 mg/L、39.598 mg/L、0.009 mg/L、0.0122 mg/L,SC分别为1.223 mg/L、62.66 mg/L、10.182mg/L、0.0018 mg/L、0.0031 mg/L。结果表明:五种农药对昆明裂腹鱼幼鱼的敏感性大小依次为:甲氰菊酯>阿维菌素>草甘膦铵盐>乐果>草甘膦。5、研究了乐果对昆明裂腹鱼幼鱼的毒性效应及Vc对其作用造成的影响。结果显示:(1)大于SC的试验组,昆明裂腹鱼幼鱼的EROD、CAT、MDA及AchE活性均显著上升,SC及小于SC的试验组,EROD、CAT、MDA及AchE活性较小;(2)添加Vc后,不同组织中EROD活性上升,CAT、MDA及AchE活性不同程度下降。结果表明:(1)乐果浓度大于SC时,对机体造成的损伤在一定程度上无法修复,小于SC时对机体基本无影响;(2)Vc在一定程度上能清除生物体内的自由基,增强耐药性,在保护机体免受外源物质氧化损伤等方面发挥了积极作用。6、研究了乐果对昆明裂腹鱼幼鱼HSP70 mRNA的影响及Vc对其影响的作用。结果显示:不同浓度乐果诱导下HSP70 mRNA水平显著表达(P<0.05),随着胁迫时间的延长,从24 h到96 h除最高浓度组,其余各组变化均不显著(P﹥0.05),120 h在Vc添加后各组HSP70 mRNA表达水平均显著下降(P<0.05),较低两浓度组的表达水平接近对照组。结果表明:乐果能诱导昆明裂腹鱼幼鱼HSP70 mRNA的表达,Vc能显著降低其表达量,增强昆明裂腹鱼幼鱼对乐果的耐受性,协助机体完成自身调节功能。
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