香豆素类荧光探针的合成及其对亚硫酸盐和硫化氢的区分检测

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荧光分子探针技术因灵敏度高、选择性好、使用方便、成本低等优点在分析化学领域应用广泛。本文设计合成了三类小分子荧光探针并将其应用于对亚硫酸盐和硫化氢的区分检测。  利用迈克尔加成反应,基于分子内电荷转移机理设计合成了2个亚硫酸盐分子探针。探针m6和m7是以香豆素为发色团的荧光探针,具有较大的Stokes位移,发射波长分别位于631nm和640nm,有助于更好地消除生物背景的干扰。亚硫酸盐在2h内可以使探针的光谱性质发生明显改变,最大激发和发射波长分别蓝移了101nm和132nm。探针m7对亚硫酸盐具有较高的选择性和检测灵敏度,检测限可低至0.10μmol/L。  对m6和m7分子上的吡啶基甲基化制得相应的季铵盐m-PSP和p-PSP增加了分子的水溶性。同时因为季铵盐较强的吸电子能力,加快了探针与亲核试剂(亚硫酸盐、硫化氢)的反应速度,可在不同时间间隔分别测定亚硫酸盐(10min)和硫化氢(2h)。检测时间为10min时,探针对亚硫酸盐具有极高的选择性和检测灵敏度。当检测时间为2h时,探针对硫化氢具有较高的选择性,硫化氢使得探针的荧光最大增强约40倍。探针m-PSP对亚硫酸盐和硫化氢的检测限分别为8.5×10-7mol/L和2.7×10-7mol/L。另外,探针m-PSP和p-PSP还可以应用于活细胞中的亚硫酸盐或硫化氢的生物成像。表明了探针m-PSP和p-PSP在检测活细胞中亚硫酸盐和硫化氢的可能性。  设计合成了比率型荧光探针MSP用于对亚硫酸盐和硫化氢的区分检测。比率型荧光探针可以有效地消除外界干扰,得到更准确的结果。探针MSP在5min内对亚硫酸盐具有明显的光谱响应(显著的颜色改变);而当反应时间为3h时,硫化氢使得体系的荧光增强约155倍。可以分别用紫外光谱和荧光光谱分别检测亚硫酸盐和硫化氢。
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