论文部分内容阅读
目的1通过检测职业暴露工人尿中砷化合物形态和含量,评价职业暴露工人机体砷负荷情况；2检测砷代谢相关酶As3MT基因多态性位点rs7085104、rs11191454、 rs10883790、rs1046778以及GSTM1和GSTT1基因多态性,分析不同基因型个体砷化合物分布情况,评价As3MT.GSTM1和GSTT1基因多态性对砷化合物分布的影响；3研究砷代谢相关酶As3MT基因多态性位点rs7085104、rs11191454、 rs10883790、rs1046778以及GSTM1和GSTT1基因多态性与砷甲基化水平的关系,评价As3MT、GSTM1和GSTT1基因多态性对砷甲基化代谢的影响。方法1采用典型抽样的方法,抽取砒霜厂职业性砷暴露工人,采集其尿液样本和外周血液样本；2采用HG-oldtrap-AAS法测定TiAs、iAs、MMA、DMA四种形态的砷含量,并计算iAs%、MMA%、DMA%、PMI、SMI等砷甲基化指标；3采用离心柱法提取外周血液样本基因组DNA,使用限制性片段长度多态性PCR方法检测As3MT基因rs7085104、rs11191454、rs10883790、rs1046778位点多态性,使用多重PCR方法检测GSTM1和GSTT1基因多态性；4采用t检验、完全随机设计单因素方差分析砷代谢相关酶基因多态性不同基因型个体中尿砷的分布情况,采用多重线性回归分析基因多态性与砷甲基化水平的关系。结果1尿中iAs、DMA、MMA、TiAs水平尿中iAs、DMA、MMA和TiAs浓度的中位数(最小值,最大值)分别为158.75(5.38,971.11)μg/ml、301.72(5.84,1361.35)μg/ml、1152.31(43.06,4258.11)μg/ml和1533.09(54.28,5981.34)μg/ml,尿总砷水平明显高于ACGIH最新制定的BIEs,即35μg/ml。2砷相关代谢酶基因多态性情况2.1rs7085104的AA型有19人,AG型12人,GG型12人,构成比分别为44.18%、27.91%、27.91%；rs11191454的AA型有17人,AG型16人,GG型10人,构成比分别为39.53%、37.21%和23.26%；rs10883790的AA型有17人,AC型15人,CC型11人,构成比分别为39.53%、34.88%和25.58%；rs1046778的CC型有19人,TC型14人,TT型10人,构成比分别是44.19%、32.56%和23.26%；2.2GSTM1缺失型18人,非缺失型25人,各占41.86%和58.14%,GSTT1基因缺失型30人,非缺失型13人,分别占69.77%和30.23%；GSTT1+GSTM1联合基因型中M(-)T(-)基因型13人,M(-)T(+)5人, M(+)T(-)17人,M(+)T(+)8人,分别占30.23%、11.63%、39.53%、18.60%。3砷相关酶基因多态性不同基因型个体中尿砷分布情况3.1MMA、DMA、TiAs在As3MT基因四个SNPs不同基因型个体中的分布均有差(P<0.05),iAs和砷甲基化指数在四个SNPs不同基因型个体中没有差异(P>0.05)。3.2GSTM1基因缺失型个体的iAs、MMA、TiAs高于非缺失型(P<0.05),DMA和砷甲基化指数在两种基因型个体中没有差异(P>0.05); iAs、MMA、 MMA%、DMA%、SMI在GSTT1不同基因型个体中分布有差异,其中缺失型的iAs、MMA、MMA%高于非缺失型,而DMA%和SMI则是非缺失型高于缺失型(P<0.05), DMA、TiAs、iAs%、PMI在GSTT1基因多态性中差异不显著(P>0.05)。3.3iAs、MMA在GSTT1+GSTM1四种基因型个体中的分布有统计学差异(P<0.05), DMA. TiAs以及砷甲基化指数的比较无差异(P>0.05)。4砷相关酶基因多态性与砷甲基化水平分析rs7085104和GSTM1+GSTT1联合基因型多态性对MMA%具有负向性作用,rs7085104的AA基因型和M(-)T(-)基因型可能抑制砷的一甲基化水平,rs7085104对SMI具有正向性作用,rs7085104的AG+GG基因型可能会提高砷的二甲基化水平。结论1在本研究中职业性砷暴露个体机体内砷化合物浓度明显升高,暴露个体可能存在潜在的职业危害。2砷化合物在As3MT基因四个SNPs不同基因型个体中分布不同,As3MT基因多态性能影响砷代谢转化,其中rs7085104与砷甲基化水平密切相关,AA+GG基因型可能具有促进砷甲基化的作用。3砷化合物在GSTM1、GSTT1和联合基因不同基因型个体中分布不同,GSTT1和联合基因多态性与砷甲基化水平有关,其中GSTT1基因缺失型和M(-)T(－)对砷甲基化水平可能具有抑制作用。