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本研究立足于广西桂北自然开花结实的野生毛竹林,主要从毛竹种子、花粉、试管苗等几个方面进行其种质资源的保存研究,得出以下结论:
(1)通过将种子干燥成5个含水量梯度:3.07、5.72%、7.45%、9.48%和11.24%,分别密封保存于25℃、4℃和-20℃温度下,定期检测种子活力变化,寻找其保存的最适条件。结果表明,含水量降为3.07%和5.72%的种子发生干燥损伤,说明毛竹种子不适宜过度干燥;25℃下,种子保存的最适含水量为7.45%,活力在210d内下降不显著;4℃下,种子保存的最适含水量为11.24%;-20℃时,种子保存的最适含水量为11.24%。不同温度下种子保存的最适含水量不同,有随保存温度下降而升高的趋势。最终结果为,4℃、11.24%MC保存的毛竹种子效果最好,保存310d后发芽率仅从74.0%下降到59.3%,推荐为毛竹种子保存的技术参数。
保存150d的毛竹种子随着保存温度的升高,POD、SOD、CAT的活性下降,种子活力也显著下降。进行典型相关分析,表明SOD、POD能够显著反应毛竹种子活力变化。
(2)毛竹种子适宜液氮(-196℃)保存,且不需要特殊处理即可投入液氮,取出时也不需要解冻处理。试验发现毛竹种子不会受到液氮的低温损伤,相反液氮保存却有加速种子萌发的作用。
(3)毛竹花粉属于短命型,室内自然状态下搁置活力丧失极快。通过对花粉保存条件的对比试验,得到毛竹花粉适宜的保存条件为:盛花期的上午7:00~10:00,采下未开裂,但完全伸出、发育成熟的花药,室内阴干1h后,装入离心管,密封保存于4℃下,活力可持续80h,比对照组(自然状态放置)寿命延长约9倍。适合毛竹花粉萌发的培养基为15%蔗糖+0.001%硼酸,25℃下培养1h,萌发率最高达92.5%,且萌发过程中硼必不可少。
(4)本研究初步探讨了毛竹试管苗的低温保存技术。采用MS培养基培养种子获得4~6片叶苗,放入6℃的冰箱保存培养。4个月后,植株平均增长量为0.3cm,没有新叶的发生,可有效抑制试管苗的生长,存活率为75%,且后期的恢复生长良好。最终得到,毛竹种质可用试管苗进行低温保存。