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目的:在前期临床应用的基础上,观察临床经验效方扶肝化纤汤对四氯化碳(Carbon tetrachloride,CCL4)联合酒精复合物诱导的肝纤维化(Hepatic fibrosis,HF)模型大鼠肝组织病理及肝组织转化生长因子-β1(Transforming growth factor beta1,TGF-β1)mRNA的影响,探讨扶肝化纤汤抗HF的作用机制。 方法:清洁级SD大鼠随机分两组:空白组25只、造模组55只。空白组用等剂量0.9%氯化钠注射液灌胃,造模组用40%CCL4橄榄油溶液腹腔注射,2次/周,第2周开始用20%酒精灌胃,隔天1次造模。第6周起,每周日随机挑选3只造模组大鼠及2只空白组大鼠处死,作HF病理学检查,直到发现≥2期HF,即确定模型复制成功。保留空白组大鼠10只(随机抽取),造模完成后HF大鼠30只(随机抽取),随机分3组:模型组、秋水仙碱组、中药组各10只,进行4周药物干预。空白组、模型组用0.9%氯化钠注射液灌胃,秋水仙碱组用秋水仙碱溶液灌胃,中药组用扶肝化纤汤灌胃。治疗结束后检测血清谷丙转氨酶(Alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(Aspartate transaminase,AST)、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)、谷氨酰转肽酶(Glutamyl transpeptidase,GGT)、总蛋白(TotalProtein,TP)、白蛋白(Albumin,ALB);酶联免疫吸附测定(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)血清透明质酸(Hyaluronic acid,HA)、Ⅳ胶原(CollagenⅣ,C-Ⅳ)、羟脯氨酸(Hydroxyproline,Hyp);肝组织苏木精-伊红染色(Hematoxylin-eosin staining,HE)光镜下观察肝脏病理学改变;实时荧光定量核酸扩增检测系统(Real-time Quantitative PCR Detecting System,qPCR)检测肝组织中TGF-β1mRNA表达水平。 结果:1.血清ALT、AST、ALP比较方面,模型组与空白组比较,中药组与模型组、秋水仙碱组比较,均具有显著统计学意义(P<0.01);血清GGT、TP、ALB比较方面,模型组与空白组比较,中药组与模型组比较,均具有显著统计学意义(P<0.01),中药组GGT与秋水仙碱组比较,具有显著统计学意义(p<0.01),中药组TP、ALB与秋水仙碱组比较,均具有统计学意义(p<0.05)。2.血清HA、C-Ⅳ、Hyp比较方面,模型组与空白组比较,中药组与模型组、秋水仙碱组比较,均具有显著统计学意义(P<0.01)。3.HE染色光镜下对比:空白组大鼠肝小叶结构分明、完好,肝细胞大小、形态匀称,未见变性及坏死,肝细胞呈条索状排布且包绕中心静脉呈六边形向边缘散布,肝小叶之间陈设布局呈生理征象,未见纤维物质沉积于汇管区内。模型组大鼠肝小叶构架受损,肝细胞大小不一,肝索排布混乱无规律,伴较多炎性细胞浸润,肝内纤维明显并纤维间隔形成。与模型组相比,秋水仙碱组肝小叶受损较轻,可见部分肝细胞呈空泡状脂肪样变性,肝脏炎性细胞浸润未见显著减轻,肝脏纤维条索变细且数量较少。与秋水仙碱组相比,中药组肝细胞排列尚齐性,肝小叶结构较完整,脂肪变性程度减轻,炎性细胞浸润较少,纤维条索更细、数量更少,总体病变区域较模型组小。4.模型组肝组织TGF-β1mRNA表达量与空白组比较,具有显著统计学意义(P<0.01),秋水仙碱组、中药组和模型组比较,具有显著统计学意义(P<0.01),秋水仙碱组和中药组比较,具有显著统计学意义(P<0.01)。 结论:1.扶肝化纤汤可改善HF大鼠一般情况,升高TP、ALB,并降低ALT、AST、ALP、GGT的酶活性,改善肝功能。2.扶肝化纤汤可降低血清HA、C-Ⅳ及Hyp的含量,改善HF。3.扶肝化纤汤能抑制HF大鼠肝组织TGF-β1mRNA表达量,减少EMC沉积,减轻HF程度,这可能是本方抗HF的主要作用机制。4.以“扶肝、化瘀”为原则,以疏肝、健脾、祛瘀、解毒为具体治法可有效治疗HF。