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本研究通过定量检测肝组织HBV ccc DNA及血清HBs Ag含量,分析两者之间及与血清HBV DNA载量、肝细胞内HBs Ag和HBc Ag表达强度等临床指标的相关性,探讨二者在评价HBe Ag阳性的CHB患儿抗病毒疗效中的应用价值。研究共随机选取HBe Ag阳性CHB患儿63例,留取常规病理检剩余石蜡包埋肝组织的同时留取血清样本。应用不降解质粒的依赖ATP的DNA聚合酶(PSAD)消化+滚环扩增(RCA)+跨缺口实时荧光定量PCR方法检测肝组织HBV ccc DNA含量;电化学发光免疫分析法检测血清HBs Ag含量及乙型肝炎病毒血清标志物(HBV-M);荧光定量PCR法检测血清HBV DNA载量及HBV基因型;美国BECKMAN AU5621全自动生化分析仪检测血清ALT、AST水平。对肝组织进行常规病理染色,观察肝组织炎症活动度(G)和纤维化程度(S);免疫组化法检测肝细胞内HBs Ag和HBc Ag表达强度。抗病毒治疗48周时HBs Ag是否发生血清学转换作为抗病毒疗效的判定标准,t检验和卡方检验进行单因素分析;Logistic回归方法进行多因素分析;pearson简单相关和Spearman等级相关法分析肝组织HBV ccc DNA、血清HBs Ag两者之间及与其它临床检测指标之间的相关性;受试者工作特征曲线(ROC)评估肝组织HBV ccc DNA及血清HBs Ag定量对抗病毒疗效的预测价值;配对四格表χ2检验分析肝组织HBV ccc DNA及血清HBs Ag定量对抗病毒疗效的预测价值有无差异性。研究结果发现,13例患儿接受抗病毒治疗48周时发生了HBs Ag血清学转换,HBs Ag清除率为20.6%。HBs Ag血清学转换(R)组年龄明显小于HBs Ag未发生血清学转换(N-R)组(1.68±0.71 vs 6.47±3.16,P=0.000),血清AST(1.85±0.15 vs 1.98±0.31,P=0.04)、肝组织HBV ccc DNA(6.38±0.79 vs 6.79±0.66,P=0.04)、血清HBs Ag(3.48±1.22 vs4.14±0.69,P=0.009)及肝细胞内HBs Ag表达强度(P=0.012)R组均低于N-R组,差异均有统计学意义;血清ALT、HBV DNA载量、性别、HBV基因型、肝组织炎症活动度、纤维化程度及肝细胞内HBc Ag表达强度在两组间分布的差异均无统计学意义(P均>0.05)。多因素分析结果显示,血清HBs Ag、肝组织HBV ccc DNA及年龄三个变量对CHB患儿抗病毒疗效的影响有统计学意义。肝组织HBV ccc DNA与血清HBs Ag定量(r=0.464,P=0.000)呈正相关性,二者与HBV DNA载量呈正相关性(r=0.665,P=0.000;r=0.512,P=0.000)。肝组织HBV ccc DNA、血清HBs Ag分别与血清ALT、AST、肝组织炎症活动度、纤维化程度均无相关性(P均>0.05);肝细胞内HBs Ag表达强度与肝组织HBV ccc DNA定量无相关性(r=-0.024,P=0.854),与血清HBs Ag定量(r=0.258,P=0.041)呈正相关性;肝组织HBV ccc DNA定量在肝细胞HBc Ag不同表达强度组间的差异有统计学意义(P=0.003),而血清HBs Ag定量在肝细胞HBc Ag不同表达强度组间的差异无统计学意义(P=0.203)。肝组织HBV ccc DNA定量以0.08log10copies/cell为最佳临界值(cut-off)用于预测抗病毒治疗48周时HBs Ag发生血清学转换的灵敏度、特异度、阳性预测值(PPV)和阴性预测值(NPV)分别为92.0%、46.2%、86.8%和60.0%;血清HBs Ag定量以3.68log10IU/m L为cut-off预测抗病毒治疗48周时HBs Ag发生血清学转换的灵敏度、特异度、PPV和NPV分别为86.0%、69.2%、91.2%和56.3%;肝组织HBV ccc DNA、血清HBs Ag定量对抗病毒疗效预测价值的差异无统计学意义(P=0.146)。血清HBs Ag、肝组织HBV ccc DNA及年龄是影响HBe Ag阳性的CHB患儿抗病毒疗效的主要因素。肝组织HBV ccc DNA与血清HBs Ag定量呈正相关性,二者与血清HBV DNA均呈正相关性,二者结合血清ALT、AST、肝组织炎症活动度、纤维化程度临床检测指标,可全面评价CHB患儿病情变化。肝组织HBV ccc DNA与血清HBs Ag相比其更能精确反映HBV在肝细胞内的复制情况,血清HBs Ag反映的HBV感染状态,但二者对评估HBe Ag阳性的CHB患儿远期的抗病毒疗效均有较好的预测价值。因此,对于HBe Ag阳性的CHB患儿,血清HBs Ag在一定程度上可作为肝组织HBV ccc DNA检测的替代指标,结合血清HBV DNA、ALT、AST、肝组织炎症活动度、纤维化程度临床检测指标,用于指导CHB患儿抗病毒治疗具有重要的临床意义。